外源NO與蔗糖對(duì)鹽脅迫下番茄幼苗生理特性及抗逆基因的調(diào)控.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以番茄(Lycopersicon esculentum Mill)為材料，運(yùn)用盆栽土培試驗(yàn)，結(jié)合生物化學(xué)和分子生物學(xué)的方法，分別用不同濃度的蔗糖(Sucrose)、外源NO供體硝普鈉(SodiumNitropresside，SNP)及其組合(V：V=1:1)處理材料，對(duì)鹽脅迫下NO與蔗糖誘導(dǎo)番茄抗逆基因和幼苗生長(zhǎng)及抗鹽性的作用機(jī)制開(kāi)展了較為深入的研究。并獲得以下主要結(jié)果： 1. 用0.1、0.5和1.0 mmol/L，的S

2、NP處理番茄幼苗，均能緩解鹽脅迫對(duì)番茄幼苗造成的氧化損傷，提高超氧化物酶歧化酶(SOD)、過(guò)氧化物酶(POD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)和抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)活性，其中0.1 mmol/LSNP處理效果最好，尤其能顯著誘導(dǎo)APX和POD活性的增高；不同濃度的蔗糖對(duì)番茄體內(nèi)的保護(hù)酶也具有不同的誘導(dǎo)作用，和SNP誘導(dǎo)一樣具有劑量效應(yīng)，其中3.0 mmol/L的蔗糖能顯著提高酶活性，脅迫24 h各種酶活性均達(dá)到最大值，隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)開(kāi)

3、始下降，表明蔗糖對(duì)酶活性的誘導(dǎo)也有一定的調(diào)控范圍。 2.鹽分脅迫下，番茄種子的萌發(fā)受到了抑制，72 h才開(kāi)始萌發(fā)，而使用NO、蔗糖及其互作處理番茄種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)都顯著高于100 mmol/LNaCl單獨(dú)處理，NO、蔗糖及其互作處理番茄種子的最終發(fā)芽率分別為68.33％、66.67％，81.67％，其中組合處理緩解鹽脅迫的效果顯著，與單鹽處理之間差異顯著。 3.組合處理與SNP和蔗糖單獨(dú)處理相比，

4、對(duì)緩解鹽脅迫下番茄幼苗的氧化損傷存在正協(xié)同效應(yīng)，主要表現(xiàn)在進(jìn)一步增強(qiáng)了番茄幼苗抗氧化酶的活性：提高脯氨酸(Pro)的含量，同時(shí)膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量顯著降低。采用聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)鹽脅迫24 h和48 h材料的POD同功酶研究表明，當(dāng)NaCl單獨(dú)處理時(shí)，番茄幼苗葉片POD同功酶第V條帶缺失，其它譜帶酶量減少，抑制了POD同功酶的表達(dá)：SNP和蔗糖單獨(dú)處理能夠保護(hù)鹽脅迫(24、48 h)所導(dǎo)致的POD同功酶條帶的完整；而NO

5、、蔗糖及組合處理均能誘導(dǎo)番茄葉片POD同功酶活性，尤其組合處理對(duì)POD同功酶誘導(dǎo)效果最好，脅迫48h各處理POD同功酶表達(dá)量較24h減少。說(shuō)明SNP和蔗糖組合處理能夠更有效地緩解鹽脅迫對(duì)番茄幼苗植株造成的氧化損傷。 4.利用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)，檢測(cè)了抗逆相關(guān)基因NP24和PR-5在mRNA水平上的表達(dá)量。脅迫12hSNP、蔗糖及組合處理均誘導(dǎo)了幼苗中NP24基因的表達(dá)量，與單鹽處理相比分別提高了38.44％、24.48