甘蔗s-腺苷蛋氨酸脫羧酶基因(ScSAMDC)的克隆和轉(zhuǎn)化煙草的研究.pdf

1、對(duì)甘蔗干旱應(yīng)答相關(guān)基因S-腺苷蛋氨酸脫羧酶基因(ScSAMDC)進(jìn)行克隆、表達(dá)分析，有利于進(jìn)一步闡明甘蔗抗旱的分子機(jī)制，為甘蔗抗旱遺傳改良提供參考依據(jù)，同時(shí)也為其他作物抗旱遺傳改良提供候選基因。
　　(1)同源克隆分別獲得ScSAMDC1、ScSAMDC2和ScSAMDC3基因的mORF序列。ScSAMDC1基因mORF長(zhǎng)1188 bp，編碼395個(gè)氨基酸，預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)分子量為42.78 kD。ScSAMDC2基因mORF長(zhǎng)1200

2、 bp，編碼399個(gè)氨基酸，預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)分子量為43.53kD。ScSAMDC3基因mORF長(zhǎng)1188bp，編碼395個(gè)氨基酸，預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)分子量為42.96kD。
　　(2)氨基酸序列預(yù)測(cè)分析結(jié)果表明，三個(gè)酶原均為親水性蛋白，且蛋白結(jié)構(gòu)具有不穩(wěn)定性。同時(shí)，三個(gè)酶原均含有兩個(gè)高度保守的功能結(jié)構(gòu)域（PEST結(jié)構(gòu)域和酶原剪切位點(diǎn)）。
　　(3)氨基酸序列進(jìn)化樹分析結(jié)果表明，由ScSAMDC基因推導(dǎo)的氨基酸序列處于單子葉植物分支，與其

3、它禾本科植物玉米、小米、高粱、斑矛、小麥親緣關(guān)系更為接近。同時(shí)，三種甘蔗SAMDC并未聚于同一小分支。
　　(4)實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析結(jié)果表明，ScSAMDC2和ScSAMDC3的表達(dá)均受PEG的強(qiáng)烈誘導(dǎo)，且ScSAMDC2受PEG誘導(dǎo)效果強(qiáng)于ScSAMDC3。推測(cè)ScSAMDC基因可能在甘蔗抗干旱的分子機(jī)制中發(fā)揮多胺調(diào)節(jié)作用，且ScSAMDC基因家族的不同成員在對(duì)多胺調(diào)節(jié)作用中可能發(fā)揮的效果有所不同。
　　(5)成功構(gòu)建