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文檔簡(jiǎn)介
1、前言:
1969年Chihara等首次從香菇中分離出具有抗腫瘤活性的多糖,香菇多糖(Lentinan,LNT)。香菇多糖具有多種藥理學(xué)作用,是一種兼有抑制腫瘤和提高免疫功能的多糖類生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑。香菇多糖可以增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能;激活T淋巴細(xì)胞釋放活化因子;提高NK細(xì)胞活性;誘導(dǎo)干擾素或白細(xì)胞介素等細(xì)胞因子的產(chǎn)生。樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的專職抗原遞呈細(xì)胞(antigen pres
2、enting cell,APC),具有獨(dú)特的抗原遞呈和激活功能;它可以特異捕捉抗原,表達(dá)高水平的細(xì)胞內(nèi)主要組織相容抗原MHC-Ⅱ(MHC-Ⅱ)類分子和協(xié)同刺激分子CD80和CD86,并能移行至淋巴器官,刺激初始型T細(xì)胞增殖活化,同時(shí)刺激B淋巴細(xì)胞增殖成熟。DCs作為免疫反應(yīng)的核心和關(guān)鍵,在腫瘤細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的相互作用中起橋梁和樞紐作用。所以人們?cè)絹?lái)越熱衷于有關(guān)DCs的研究,尤其是在腫瘤方面的應(yīng)用。鑒于LNT在免疫系統(tǒng)中的顯著調(diào)節(jié)作用,
3、所以研究LNT對(duì)DCs的作用對(duì)于闡明LNT對(duì)免疫系統(tǒng)作用機(jī)理十分必要。本研究就LNT對(duì)小鼠骨髓來(lái)源樹突狀細(xì)胞成熟過(guò)程中表型及功能變化的影響作用進(jìn)行探討。
方法:
本實(shí)驗(yàn)采用小鼠骨髓來(lái)源樹突狀細(xì)胞(bone marrow dendritic cells,BMDCs)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),采集小鼠骨髓,誘導(dǎo)培養(yǎng)成樹突狀細(xì)胞。將小鼠骨髓來(lái)源樹突狀細(xì)胞分成LPS陽(yáng)性對(duì)照組,LNT處理組和RPMI1640空白對(duì)照組,應(yīng)用酸性磷酸酶活性檢測(cè)
4、技術(shù)、流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)、吞噬實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)各組BMDCs表型和功能的各種指標(biāo)。
結(jié)果:
1.LNT處理組和LPS組BMDCs酸性磷酸酶活性均低于RPMI1640組;
2.LNT組和LPS組相似,可上調(diào)BMDCs表面MHCⅡ、CD40、CD83、CD80、CD86和DEC205的表達(dá);
3.LNT處理組和LPS組BMDCs吞噬能力比RPMI1640空白對(duì)照組明顯下降;
5、r> 4.ELISA結(jié)果顯示1640組BMDCs的IL-12p70和TNF-a分泌較少,LNT組和LPS組BMDCs高分泌IL-12p70和TNF-a。
結(jié)論:
1.適宜濃度的LNT可以刺激DCs表型和功能的成熟。
2.適宜濃度的LNT作用使DCs細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶活性下降、減低DCs細(xì)胞對(duì)FITC-dextran的吞噬能力,表明DCs吞噬抗原能力下降,遞呈能力增加,趨向成熟。
3.適宜濃度的L
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