半葉馬尾藻中巖藻聚糖硫酸酯的提取純化及降血脂功能研究.pdf

1、本文對(duì)采自廣東湛江硇洲島的半葉馬尾藻，進(jìn)行了巖藻聚糖硫酸酯提取工藝的優(yōu)化研究。對(duì)半葉馬尾藻粗巖藻聚糖硫酸酯進(jìn)行分離、純化，并研究其抗氧化和降血脂功能活性，為開(kāi)發(fā)和利用這一資源提供理論依據(jù)。 通過(guò)常規(guī)成分分析得出半葉馬尾藻的基本化學(xué)組成為：水分11.53％，蛋白質(zhì)7.69％，脂肪1.60％，粗纖維8.95％，灰分16.80％，總碳水化合物53.40％ 以多糖提取率和硫酸基含量為指標(biāo)，分別討論了溫度、提取時(shí)間、加水量及pH值

2、對(duì)半葉馬尾藻粗巖藻聚糖硫酸酯提取率和硫酸基含量的影響程度，并根據(jù)L9(34)正交表綜合分析確定最佳提取工藝條件為：pH值1.5，溫度70℃，料液比40及時(shí)間6h，在此條件下提取巖藻聚糖硫酸酯得其得率為8.73％，硫酸基含量為13.16％。 研究CaCl2法，乙醇分級(jí)沉淀法，CTAB法三種方法對(duì)純化的影響，采用DEAEC-52離子交換柱層析對(duì)純化后的巖藻聚糖硫酸酯進(jìn)行分級(jí)純化，并對(duì)各組分的化學(xué)組成進(jìn)行分析。分析得出CTAB沉淀法進(jìn)

3、行純化，優(yōu)于乙醇沉淀法和氯化鈣沉淀法。巖藻聚糖硫酸酯經(jīng)DEAEC-52柱層析得F-1，F(xiàn)-2，F(xiàn)-3三個(gè)級(jí)分，半葉馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯的化學(xué)組成為：巖藻糖、糖醛酸、硫酸根和少量蛋白質(zhì)。隨著純度的提高，巖藻糖與硫酸根的含量增加，進(jìn)而說(shuō)明巖藻糖與硫酸根為主要組成。 采用薄層層析和紅外光譜對(duì)巖藻聚糖硫酸酯的單糖組成和化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析得出巖藻聚糖硫酸酯的主要單糖為巖藻糖，半乳糖和葡萄糖醛酸其比例大約為2.5:1：0.5。紅外光譜分析表明

4、，巖藻聚糖硫酸酯中含有有機(jī)的硫酸基，巖藻糖和糖醛酸的特征吸收峰，與化學(xué)分析相符，通過(guò)進(jìn)一步分析硫酸基可能連接在巖藻糖的C2或C3位上。 采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法和鄰苯三酚自氧化法檢測(cè)巖藻聚糖硫酸酯各級(jí)分清除超氧陰離子自由基和羥基自由基能力，初步探討抗氧化效果。結(jié)果顯示半葉馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯4個(gè)級(jí)分SPF、SPF1、F-1、F-2具有顯著的抗氧化能力，其IC50分別為0.078mg/mL、0.135mg/mL、0.08mg/

5、mL、0.111mg/mL，0.157mg/mL、0.238mg/mL0.24mg/mL、0.53mg/mL，且高于抗氧化劑抗壞血酸，并且純度越高抗氧化能力越強(qiáng)，說(shuō)明巖藻聚糖硫酸酯是主要的活性物質(zhì)。通過(guò)建立實(shí)驗(yàn)小鼠高脂血癥模型，探討巖藻聚糖硫酸酯降血脂效果。結(jié)果顯示不同劑量組的半葉馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯都具有調(diào)節(jié)血脂的作用，能顯著降低血清總膽固醇(P<0.01)及甘油三酯(P<0.01)及低密度脂蛋白膽固醇(P<0.01)的含量，并可提高