乙肝病毒感染孕婦分娩嬰幼兒聯(lián)合免疫失敗機制的研究.pdf

1、目的： 通過檢測乙肝病毒攜帶孕婦分娩新生兒臍血乙肝病毒標(biāo)志物，了解乙肝病毒宮內(nèi)感染率，評價孕晚期注射乙肝免疫球蛋白（Hepatitis Bimmunoglobulin，HBIG）預(yù)防富內(nèi)感染的免疫效果；通過檢測隨訪嬰幼兒的乙肝病毒標(biāo)志物，了解免疫成功率和免疫失敗率，評價乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白主被動聯(lián)合免疫效果；并通過檢測乙肝病毒富內(nèi)感染嬰幼兒外周血中樹突狀細(xì)胞（Dentritic cell，DC）和T細(xì)胞亞群數(shù)量及細(xì)胞因子含量

2、，探討免疫失敗的機制，為進一步提高宮內(nèi)感染嬰幼兒的免疫效果，保護高危兒提供科學(xué)理論依據(jù)。 方法： 選擇在濟南市婦幼保健院分娩的HBsAg陽性孕婦（318例）及新生兒（324例）進行臨床流行病學(xué)研究，分別以孕婦產(chǎn)前是否注射HBIG、分娩方式及乙肝病毒攜帶類型分組，檢測新生兒臍血乙肝病毒表面標(biāo)志物，觀察各組的宮內(nèi)感染率；并對179例乙肝病毒攜帶孕婦分娩的主被動聯(lián)合免疫的新生兒及164例正常孕婦分娩的主動免疫的新生兒進行隨訪，

3、于一歲時抽取肘靜脈血檢測乙肝病毒標(biāo)志物，觀察免疫效果；同時根據(jù)嬰幼兒一歲時乙肝病毒標(biāo)志物的結(jié)果將宮內(nèi)感染嬰幼兒分為免疫成功組和免疫失敗組，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測兩組嬰幼兒外周血IL-12、IFN-γ和IL-23的表達(dá)含量，流式細(xì)胞術(shù)檢測兩組嬰幼兒外周血DC、T細(xì)胞的數(shù)量，采用兩樣本，檢驗比較兩組的差異，同時采用兩變量Spearman相關(guān)對DC、T細(xì)胞和細(xì)胞因子進行相關(guān)分析，分析宮內(nèi)感染主被動聯(lián)合免疫失敗的機制。 結(jié)果：

4、1.乙肝病毒宮內(nèi)感染率： 乙肝病毒攜帶孕婦分娩的新生兒宮內(nèi)感染率為17.59%（57/324），其中孕晚期注射HBIG的乙肝病毒攜帶孕婦分娩的新生兒宮內(nèi)感染率為9.76%（16/164），孕晚期未注射HBIG的乙肝病毒攜帶孕婦分娩的新生兒宮內(nèi)感染率為25.63%（41/160），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），孕晚期注射HBIG能有效阻斷HBV宮內(nèi)感染；孕婦為HBsAg、HBeAg雙陽性者，富內(nèi)感染率最高，為25.19%（34

5、/135）。 2.交互作用分析結(jié)果： 將孕婦HBeAg狀態(tài)與孕晚期是否注射HBIG進行交互檢驗分析，發(fā)現(xiàn)兩因素具有正相加交互作用，歸因交互效應(yīng)（I（AB））為6.57；歸因交互效應(yīng)百分比（AP（AB））為57.84%；純因子間歸因交互效應(yīng)百分比（AP*（AB））為63.44%。將分娩方式與孕晚期是否注射HBIG進行交互檢驗分析，發(fā)現(xiàn)兩因素具有正相加交互作用，I（AB）=0.610，AP（AB）=8.6%，AP*（AB）=

6、9.95%。 3.新生兒主被動聯(lián)合免疫效果： 正常孕婦分娩的嬰幼兒，免疫成功率為88.67%（133/150），免疫失敗率為11.33%（17/150）；乙肝病毒攜帶孕婦分娩的宮內(nèi)感染嬰幼兒，免疫成功率為59.18%（29/49），免疫失敗率為40.82%（20/49）；乙肝病毒攜帶孕婦分娩的非宮內(nèi)感染嬰幼兒，免疫成功率為77.05%（94/122），免疫失敗率為22.95%（28/122）；各組嬰幼兒慢性乙肝攜帶率分別

7、是0.67%（1/150），18.37%（9/49）和1.64%（2/122）。 4.嬰幼兒外周血DC亞群、T細(xì)胞亞群檢測結(jié)果： （1）DC亞群：免疫成功組MDC（myeloid dendritic cells，MDC）的百分比為0.31%±0.11%，絕對數(shù)為（20.62±6.32）×106/L，PDC（plasmacytoid dendritic cells，PDC）的百分比為0，28%±0.11%，絕對數(shù)為（18.

8、31士5.01）×106/L；免疫失敗組MDC的百分比為0.18%±0.07%，絕對數(shù)為（12.41±4.32）×106/L； PDC的百分比為0.16%±0.08%，絕對數(shù)為（11.74±6.83）×106/L。免疫失敗組MDC和PDC的百分比及絕對數(shù)均低于免疫成功組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 （2）T亞群：免疫失敗組CD4+百分比32.94%±7.58%和CD4+/CD8+的比值1.13±0.50均低于免疫成功組C

9、D4+百分比39.55%±8.80%和CD4+/CD8+的比值1.66±0.51，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；免疫失敗組CD8+百分比29.61%±7.08%高于免疫成功組CD8+百分比24.62%±7.23%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 5.嬰幼兒外周血細(xì)胞因子檢測結(jié)果： 免疫失敗組外周血血清IL-12、IFN-γ和IL-23的含量分別為31.38±5.44（pg/ml）、30.35±0.64（pg/ml

10、）和30.45±7.38（pg/ml）；免疫成功組外周血血清IL-12、IFN-γ和IL-23的含量則分別為40.30±6.48（pg/ml）、32.68±2.08（pg/ml）和35.54±7.90（pg/ml）。免疫失敗組中的IL-23、IL-12和IFN-γ含量均低于免疫成功組的含量，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 6.DC亞群、T亞群和細(xì)胞因子相關(guān)性分析結(jié)果： DC1（MDC）亞群百分比與IL-12表達(dá)、D

11、C2（MDC）亞群百分比與IFN-γ表達(dá)含量均呈正相關(guān)。將IL-12和IFN-γ表達(dá)含量進行相關(guān)性比較，兩者亦呈正相關(guān)。DC亞群與T亞群進行相關(guān)性比較，DC亞群與CD4+亞群呈正相關(guān)，與CD8+無相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論： 1.乙肝病毒攜帶孕婦在孕7、8、9月注射HBIG200 IU/次，注射3次，能有效阻斷宮內(nèi)感染；剖宮產(chǎn)和自然分娩對HBV宮內(nèi)感染無影響，但剖宮產(chǎn)聯(lián)合孕晚期注射HBIG阻斷效果更好，且兩因素有正交互作用；孕婦H

12、BeAg陽性與孕晚期不注射HBIG者宮內(nèi)感染率高，兩因素有正交互作用。 2.宮內(nèi)感染新生兒免疫應(yīng)答率低于正常新生兒和非宮內(nèi)感染新生兒，宮內(nèi)感染與免疫無應(yīng)答有關(guān)（OR＝2.315，P<0.05），這可能是導(dǎo)致免疫失敗原因之一。 3.免疫失敗組存在著DC亞群百分比和絕對數(shù)的降低，樹突狀細(xì)胞抗原提呈功能下降，誘導(dǎo)特異性免疫反應(yīng)能力低下，導(dǎo)致了免疫失敗。 4.免疫失敗組T淋巴細(xì)胞亞群百分比、CD4+/CD8+比值降低，可