馬鈴薯花藥培養(yǎng)影響因素的研究.pdf

1、本試驗(yàn)對(duì)34個(gè)不同的馬鈴薯品種(系)進(jìn)行花藥培養(yǎng)，研究馬鈴薯基因型、激素種類、花粉發(fā)育時(shí)期、以及培養(yǎng)基附加物硝酸銀、活性炭、馬鈴薯提取液等因素對(duì)馬鈴薯花藥愈傷組織誘導(dǎo)率及褐化率的影響；同時(shí)對(duì)馬鈴薯花藥培養(yǎng)獲得的再生植株進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定；并對(duì)獲得的雙單倍體進(jìn)行了農(nóng)藝性狀鑒定。試驗(yàn)結(jié)果如下： 1.小孢子處于單核靠邊期時(shí)，花蕾大小6.0～7.5mm左右，顏色為淺綠色，此時(shí)適于馬鈴薯花藥培養(yǎng)。 2.馬鈴薯花藥培養(yǎng)對(duì)基因型有很大的依

2、賴性。克新13的愈傷組織的誘導(dǎo)率高是7.4％，大地三號(hào)和尤金的愈傷組織的誘導(dǎo)率為0。 3.低溫預(yù)處理和熱激處理均能明顯地提高馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)率，克新16在4℃條件下處理4d效果好，誘導(dǎo)率可達(dá)13.18％。接種后的馬鈴薯花藥在32℃熱激處理，處理時(shí)間為48h效果好，訥16誘導(dǎo)率達(dá)14.93％。當(dāng)熱激與低溫處理配合使用效果好，克13誘導(dǎo)率可達(dá)14.93％。 4.甘露醇預(yù)處理訥16和克新13，隨著處理的天數(shù)增加，愈傷誘導(dǎo)率

3、均呈現(xiàn)了先升后降的趨勢(shì)，不同的材料，達(dá)到誘導(dǎo)率最高值的預(yù)處理天數(shù)基本相同。預(yù)處理時(shí)間為4d愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)到最大值。甘露醇濃度40g/L效果好。 5.激素對(duì)花藥培養(yǎng)起關(guān)鍵性的作用。MS+NAA0.5mg/L+2，4-D1.0mg/L+KT1.0mg/L適合愈傷組織的誘導(dǎo)。 6.蔗糖濃度為6％B寸，馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)率高。馬鈴薯提取液能夠促進(jìn)愈傷組織的發(fā)生，濃度為50g/L效果較好。當(dāng)蔗糖和麥芽糖濃度都為6％時(shí)，麥芽糖對(duì)

4、愈傷組織的誘導(dǎo)率要好于蔗糖。 7.適量添加硝酸銀和活性炭可以減輕一些作物花藥培養(yǎng)時(shí)的褐化程度，培養(yǎng)基中加入20mg/L硝酸銀效果最佳，活性炭的濃度1.5g/L效果最佳。 8.利用氣孔保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體計(jì)數(shù)法可鑒定植株染色體倍性。本試驗(yàn)結(jié)果表明：克新16雙單倍體氣孔保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體數(shù)在10～20個(gè)范圍內(nèi)，四倍體在20～30個(gè)范圍內(nèi)，葉綠體數(shù)少于20個(gè)的為雙單倍體，多于20個(gè)而少于30個(gè)的為四倍體。 9.移栽的雙單倍體植株