葡萄籽原花青素對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性糖尿病及腎損傷的影響.pdf

1、目的：在天然、營(yíng)養(yǎng)、回歸大自然的熱潮中，人們?cè)絹?lái)越趨向于使用天然抗氧化劑，從植物資源中尋找安全、高效的天然抗氧化劑成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。葡萄籽原花青素(GSPE)是一種具有廣泛生物活性，且安全高效的天然抗氧化劑，在功能食品、醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域受到極大的關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，GSPE在清除自由基、抗氧化，抗動(dòng)脈粥樣硬化，降血脂，抗炎，調(diào)節(jié)免疫等方面具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。迄今，有關(guān)GSPE對(duì)糖尿病及其慢性并發(fā)癥的防治方面的研究甚少，作用機(jī)制也尚未明確

2、。本文在以往研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)制備四氧嘧啶大鼠糖尿病模型，從腎功能、抗氧化系統(tǒng)、NO系統(tǒng)等方面進(jìn)行分析，旨在探討GSPE對(duì)糖尿病，尤其是糖尿病腎損傷的防治作用及其可能機(jī)理。 方法：健康雄性SD大鼠，體重160M80g，適應(yīng)性飼養(yǎng)5天，按體重隨機(jī)分為正常對(duì)照組(10只)、模型組(40只)，模型組大鼠禁食12h，按200mg／kg．bw(分兩次隔日注射)腹腔注射新鮮配制的4％四氧嘧啶生理鹽水溶液，72h后剪尾采血測(cè)定空腹血糖，以血糖

3、值(≥)16．7mmol／L并伴有多飲、多食、多尿癥狀者作為糖尿病(DM)大鼠，不合標(biāo)準(zhǔn)的大鼠棄用。將篩選出的30只DM大鼠按血糖值隨機(jī)分為DM對(duì)照組、GSPE高劑量組(150mg／kg'bw)、GSPE低劑量組(50mg／kg'bw)，每組10只。各組動(dòng)物自由飲水?dāng)z食，GSPE各劑量組大鼠每日灌胃給予GSPE水溶液，正常對(duì)照組及DM對(duì)照組給予等體積的蒸餾水，共觀察6周。實(shí)驗(yàn)期間每2周采血測(cè)空腹血糖1次，每周稱重1次。至實(shí)驗(yàn)期末，將動(dòng)物

4、置于潔凈代謝籠，收集24h尿，記錄體重后，乙醚吸入麻醉，心臟采血，離心分離血清測(cè)定尿素氮(BUN)、肌酐(Cre)等腎功能指標(biāo)及血清總抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)；并剖取雙腎，準(zhǔn)確稱重，制備lO％腎組織勻漿及提取’腎臟線粒體，測(cè)定組織丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性、NO含量和NOS活性，腎臟線粒體活性氧(ROS)生成及Na+-K+-ATP酶、C

5、a2+-ATP酶活性。 結(jié)果：(1)GSPE對(duì)糖尿病大鼠血糖的影響實(shí)驗(yàn)期間，DM對(duì)照組大鼠血糖維持在較高水平，遠(yuǎn)高于正常組大鼠血糖，GSPE組大鼠血糖水平與DM組比較差異無(wú)顯著性(p>0．05)。(2)GSPE對(duì)糖尿病大鼠體重、腎重指數(shù)及腎功能的影響DM對(duì)照組和GSPE劑量組大鼠的體重均明顯低于正常組(p<0．01)。DM對(duì)照組大鼠的。腎重指數(shù)、肌酐清除率(CCr)、24h尿蛋白、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、均較正常組

6、大鼠有明顯升高(p<0．01)。GSPE高劑量組大鼠的腎重指數(shù)、CCr、24h尿蛋白、SCr低于DM對(duì)照組，GSPE低劑量組大鼠的CCr、24h尿蛋白、BUN亦低于DM對(duì)照組，差異均有顯著性。(3)GSPE對(duì)糖尿病大鼠抗氧化酶活性、脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)及腎臟線粒體活性氧生成的影響與正常對(duì)照組比較，DM對(duì)照組大鼠血清總抗氧化能力(T-AOC)、腎組織SOD、GSH-Px活性明顯降低，腎組織MDA含量明顯升高，-腎臟線粒體的活性氧(ROS)生成亦

7、明顯高于正常組大鼠，差異均有顯著性。而GSPE高劑量組大鼠’腎組織SOD、GSH-Px活性較DM對(duì)照組明顯升高，MDA含量明顯降低，。腎臟線粒體內(nèi)ROS生成亦低于DM對(duì)照組，差異均有顯著性。(4)GSPE對(duì)糖尿病大鼠腎臟線粒體ATP酶的影響與正常對(duì)照組比較，DM對(duì)照組大鼠腎臟線粒體Na+-K+-ATP酶、Ca2+一ATP酶活性明顯降低(p

8、O．05)。(5)GSPE對(duì)糖尿病大鼠NO、NOS的影響DM對(duì)照組大鼠腎臟、血清NO含量及NOS活性與正常對(duì)照組相比明顯升高。GSPE低劑量組大鼠的腎臟NO含量、血清及腎臟NOS活性低于DM對(duì)照組，GSPE高劑量組大鼠的血清NOS活性亦低于DM對(duì)照組，差異均有顯著性。 結(jié)論：(1)GSPE對(duì)糖尿病大鼠的血糖無(wú)明顯影響。(2)GSPE可改善糖尿病大鼠的腎功能，降低腎臟MDA含量，減少腎臟線粒體ROS生成量，提高腎臟SOD、GSH-

9、Px的活性，提示GSPE對(duì)糖尿病腎病具有一定的防治作用。(3)GSPE可提高腎臟線粒體Na+一K+-ATP酶和Ca++-ATP酶活性，對(duì)維持腎臟線粒體的鈣平衡具有一定的作用。(4)GSPE對(duì)NOS活性具有一定程度的抑制作用，可降低血清及腎臟的NO含量。綜上所述，GSPE對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠腎臟具有保護(hù)作用，對(duì)腎功能有一定的改善作用。其機(jī)理可能是通過(guò)其抗氧化作用提高機(jī)體抗氧化防御能力，減少ROS的生成，抑制腎臟脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，促進(jìn)過(guò)氧化物