胃癌阿霉素敏感性預(yù)測(cè)模型的建立與驗(yàn)證.pdf

1、化療是治療進(jìn)展期胃癌的重要手段，阿霉素作為最常用的化療藥物之一，臨床上常與其他化療藥物（如5-氟尿嘧啶、順鉑）配伍用于胃癌的化療，但是臨床上胃癌化療的效果并不滿意，有文章報(bào)道胃癌對(duì)阿霉素的敏感性僅為30％，其中最主要的原因是胃癌細(xì)胞具有天然耐藥或者在化療過(guò)程通過(guò)接觸化療藥物中獲得耐藥性。因此，提前預(yù)測(cè)胃癌患者是否對(duì)阿霉素敏感對(duì)于化療效果非常重要，然而目前臨床并未常規(guī)開展藥物敏感性檢測(cè)的細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)，主要原因在于其細(xì)胞培養(yǎng)周期長(zhǎng)、易污染、難

2、于標(biāo)準(zhǔn)化。利用基因芯片技術(shù)預(yù)測(cè)化療藥物敏感性已見(jiàn)諸報(bào)道，但此方法耗資巨大，對(duì)實(shí)驗(yàn)室硬件條件要求較高，同樣也難以臨床常規(guī)開展。為此我們?cè)诒狙芯恐刑接懯欠窨赡芾没蛐酒峁┑男畔?，獲得一些能夠預(yù)測(cè)胃癌細(xì)胞阿霉素敏感性的關(guān)鍵分子，建立阿霉素耐藥預(yù)測(cè)模型。
　　【目的】：利用基因芯片信息建立胃癌阿霉素敏感性多分子預(yù)測(cè)模型，用于輔助臨床化療決策。
　　【方法】：1.cDNA微陣列分析技術(shù)檢測(cè)胃癌細(xì)胞及其阿霉素耐藥細(xì)胞SGC7901與

3、SGC-7901/ADR全基因表達(dá)譜間的差異基因；2.從斯坦福大學(xué)基因芯片數(shù)據(jù)庫(kù)(http://genome-www5.stanford.edu)引入另外一株胃癌阿霉素耐藥細(xì)胞EPG-257RDB及其親本細(xì)胞EPG-257P的全基因表達(dá)譜并分析其差異性基因；3.比較兩個(gè)細(xì)胞系間的共同差異性基因；4.利用cDNA微陣列分析軟件PAM篩選后續(xù)實(shí)驗(yàn)的目的基因；5.采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)人胃癌組織標(biāo)本中目的基因的表達(dá)情況；6.采用胃癌原代細(xì)胞

4、培養(yǎng)法測(cè)定人胃癌標(biāo)本阿霉素敏感性；7.利用統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)人胃癌組織標(biāo)本中目的基因的表達(dá)情況及阿霉素敏感性作多元回歸分析，建立多分子預(yù)測(cè)模型；8.對(duì)驗(yàn)證組的胃癌標(biāo)本作相同的處理并統(tǒng)計(jì)分析多元回歸模型的可靠性。
　　【結(jié)果】：1.胃癌細(xì)胞及其耐藥細(xì)胞SGC7901與SGC-7901/ADR對(duì)比共發(fā)現(xiàn)差異性基因471個(gè)；EPG-257RDB與其親本細(xì)胞EPG-257P對(duì)比共發(fā)現(xiàn)差異性基因10,144個(gè)；2.通過(guò)對(duì)比兩個(gè)細(xì)胞系的胃癌細(xì)胞及其阿

5、霉素耐藥細(xì)胞的全基因表達(dá)譜，得到90個(gè)在表達(dá)上具有相同趨勢(shì)的差異性基因，其中僅PJA1在耐藥細(xì)胞低表達(dá)，余基因均在耐藥細(xì)胞中高表達(dá)；3.利用cDNA微陣列分析軟件PAM篩選后得到7個(gè)與阿霉素化療敏感性相關(guān)的候選基因，分別是ADAM22、CYR61、IFITM1、FN1、SPHK1、G1P2、GNAI1，均在耐藥細(xì)胞中高表達(dá)；4.利用NLReg統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)20例人胃癌組織標(biāo)本中候選基因的表達(dá)情況及阿霉素敏感性作多元回歸分析，建立多分子阿霉素

6、敏感性預(yù)測(cè)模型；此模型中IFITM1和G1P2這兩個(gè)基因被排除，預(yù)測(cè)模型的相關(guān)系數(shù)達(dá)0.8838；5.19例人胃癌組織標(biāo)本給予同上的處理，對(duì)目的基因的表達(dá)情況及阿霉素敏感性結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證，證明建立的多分子阿霉素敏感性預(yù)測(cè)模型有效(r=0.7316)；6.對(duì)胃癌新鮮組織標(biāo)本進(jìn)行HDRA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)阿霉素的敏感性低于30％。
　　【結(jié)論】：1.建立了基于ADAM22、CYR61、FN1、SPHK1、GNAI1這5個(gè)基因的多分子阿霉素敏感性預(yù)