丙戊酸鈉對體外培養(yǎng)的小鼠胚胎細(xì)胞增殖和分化的影響.pdf

1、目的 觀察體外培養(yǎng)的小鼠胚胎中腦細(xì)胞和肢芽細(xì)胞在不同劑量丙戊酸鈉的作用下增殖和分化的變化，探討丙戊酸鈉體外發(fā)育毒性的特點(diǎn)，揭示其致畸性和作用機(jī)理。 方法 根據(jù)Flint等報(bào)道的微團(tuán)培養(yǎng)方法，在本實(shí)驗(yàn)室建立小鼠中腦神經(jīng)細(xì)胞和肢芽細(xì)胞微團(tuán)培養(yǎng)模型，從12天齡小鼠胚胎中分離出中腦神經(jīng)細(xì)胞和后肢芽細(xì)胞，體外暴露于不同劑量的丙戊酸鈉(終濃度分別是0、25、50、75、100、150和200mg/l)連續(xù)培養(yǎng)5天。5天后，應(yīng)

2、用噻嘩藍(lán)(MTT)比色方法評估細(xì)胞增殖狀況，并估算出細(xì)胞集落形成抑制水平，來反映丙戊酸鈉對體外培養(yǎng)的中腦神經(jīng)細(xì)胞和肢芽細(xì)胞增殖和分化的影響。 結(jié)果 1．不同劑量的丙戊酸鈉對體外培養(yǎng)的胚胎肢芽細(xì)胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明顯的劑量一效應(yīng)關(guān)系(r=-0.950，r=-0.968，P<0.05)，其半數(shù)增殖抑制濃度(IP<,50>)和半數(shù)分化抑制濃度(ID<,50>)分別是99.31mg/l，64.82mg/l，IP<,

3、50>/ID<,50>=1.53。 2．不同劑量的內(nèi)戊酸鈉對體外培養(yǎng)的胚胎中腦神經(jīng)細(xì)胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系(r=-0.961，r=-0.938，P<0.05)，其半數(shù)增殖抑制濃度(IP<,50>)和半數(shù)分化抑制濃度(ID<,50>)分別是124.46mg/l，90.79mg/l，IP<,50>/ID<,50>=1.37。 結(jié)論 根據(jù)Flint，renault等人提出的體外致畸實(shí)驗(yàn)判斷