眼用輔料海藻酸鈉的制備及其在滴眼液中的應(yīng)用研究.pdf

1、海藻酸是從海帶等褐藻類植物中提取的一種黏性多糖，由古洛糖醛酸和甘露糖醛酸兩種結(jié)構(gòu)單元構(gòu)成。海藻酸鈉（sodiumalginate，以下簡稱SA）是其鈉鹽，具有良好的生物相容性、可降解性和膠凝性，已被應(yīng)用到醫(yī)藥領(lǐng)域中。
　　 我國的SA產(chǎn)量居世界首位，但絕大部分應(yīng)用于食品等低附加值產(chǎn)業(yè)。SA雖被中國藥典2010年版作為藥用輔料收錄，并有相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，但未達(dá)到眼用輔料的質(zhì)量要求。
　　 本課題旨在研究適合工業(yè)化生產(chǎn)眼用輔料

2、SA的工藝，制備高質(zhì)量的眼用輔料SA;并通過體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，對SA的安全性進(jìn)行評價;考察SA在滴眼液中的緩釋作用;考察SA與滴眼液中常用輔料的可配伍性及探索含SA的滴眼液的滅菌生產(chǎn)方法。
　　 1眼用輔料海藻酸鈉的制備
　　 目的:確定眼用輔料SA的制備工藝。方法:采用硅藻土過濾粗品溶液、活性炭吸附色素和蛋白質(zhì)、離子交換樹脂除鈣、鹽-醇沉淀法沉淀SA以及甲醛浸泡除細(xì)菌內(nèi)毒素等純化步驟對SA進(jìn)行純化，并考察各步驟中關(guān)鍵因素

3、對產(chǎn)品收率和質(zhì)量的影響。結(jié)果:確定了最佳的制備工藝，所得產(chǎn)品色澤好、純度高，收率可達(dá)75％。結(jié)論:該制備工藝簡單、方便，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
　　 2眼用輔料海藻酸鈉的質(zhì)量研究
　　 目的:進(jìn)行眼用輔料SA的質(zhì)量研究，制定眼用輔料級SA的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法:參照美國、歐洲和中國藥典中的SA藥用輔料標(biāo)準(zhǔn)及眼用輔料級玻璃酸鈉（sodiumhyaluronate，以下簡稱SH）等標(biāo)準(zhǔn)，制定眼用輔料級SA的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)制定的標(biāo)準(zhǔn)對制備

4、的SA進(jìn)行質(zhì)量檢查。結(jié)果:制定的眼用輔料級SA質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)包括性狀、鑒別、澄清度與顏色、酸堿度、黏度、吸光度、乙醇?xì)埩袅?、甲醛殘留量、Mr與Mr分布、氯化物、干燥失重、總灰分、熾灼殘?jiān)⒅亟饘?、砷鹽、細(xì)菌內(nèi)毒素、微生物限度和含量測定等項(xiàng)目。經(jīng)本工藝制備的眼用輔料SA經(jīng)檢測，結(jié)果顯示可達(dá)到本眼用輔料級SA標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論:本課題研制的眼用輔料SA，質(zhì)量可以達(dá)到所制定的眼用輔料級SA的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　 3眼用輔料海藻酸鈉安全性評價
　　

5、 目的:評價SA眼部應(yīng)用的安全性。方法:分別用0.25mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL和2.0mg/mL的SA溶液處理人角膜上皮細(xì)胞(humancornealepithelialcell，以下簡稱HCEC)24h和48h后，利用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，采用噻唑藍(lán)(3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyltetrazoliumbromide，以下簡稱MTT)法檢測細(xì)胞存活率。向

6、兔眼中分別滴加2.5mg/mL、5.0mg/mL、7.5mg/mL和10mg/mL的SA生理鹽水溶液，然后進(jìn)行短期多次給藥及長期給藥眼刺激試驗(yàn)，考察SA對兔眼的刺激性。結(jié)果:HCEC經(jīng)0.25～2.0mg/mL的SA處理24h和48h后，細(xì)胞形態(tài)均正常。MTT檢測結(jié)果顯示，與對照組相比，各組細(xì)胞存活率均無顯著性降低。眼部刺激性試驗(yàn)結(jié)果顯示，各濃度SA溶液均對兔眼角膜、虹膜和結(jié)膜無明顯刺激性。結(jié)論:0.25～2mg/mL的SA溶液對體外培

7、養(yǎng)的HCEC無細(xì)胞毒性。2.5～10mg/mL的SA溶液對兔眼無明顯刺激性。
　　 4海藻酸鈉在滴眼液中的緩釋作用研究
　　 目的:研究SA在滴眼液中的緩釋作用。方法:比較2.5～7.5mg/mL的SA對氯霉素溶液黏度的影響及其對氯霉素體外釋放的影響，并考察5.0mg/mL的SA對氯霉素在淚液中含量隨時間變化及由眼部吸收進(jìn)入血液速度的影響。結(jié)果:SA具有良好的增黏作用，在2.5～7.5mg/mL濃度范圍內(nèi)，隨SA濃度的增

8、大，氯霉素溶液黏度增大。在2.5～5.0mg/mL范圍內(nèi)，隨SA濃度的增大，氯霉素體外釋放速率降低。與單純氯霉素溶液相比，含5.0mg/mL的SA氯霉素溶液中的氯霉素能夠在15～45min內(nèi)在淚液中保持較高濃度，且由眼部吸收進(jìn)入血液的速度慢。結(jié)論:SA在滴眼液中具有良好的緩釋作用。
　　 5海藻酸鈉與滴眼液常用輔料的配伍研究及除菌生產(chǎn)工藝的初步研究
　　 目的:進(jìn)行SA與滴眼液常用pH緩沖體系和防腐劑的配伍可行性、含SA

9、滴眼液的除菌生產(chǎn)工藝的研究。方法:將8mg/mL的SA溶液與不同pH的磷酸鹽和硼酸鹽緩沖液混合以觀察其與常用緩沖體系的配伍可行性;在選定的緩沖體系下，觀察SA與高于常規(guī)使用濃度范圍的的常用防腐劑苯扎氯銨、羥苯酯類配伍的可行性;觀察含SA的滴眼液經(jīng)熱壓滅菌(121℃加熱10min)前后的黏度變化，探討熱壓滅菌工藝的可行性;配制含SA的滴眼液，觀察其通過0.22μm濾膜的流速探討除菌過濾工藝的可行性。結(jié)果:8mg/mL的SA溶液與磷酸鹽、硼