版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:探索同時從 C57BL/6小鼠骨髓分離培養(yǎng)間充質干細胞(MSCs)與內皮前體細胞(EPCs)并對其鑒定的方法,并探討 EPCs條件培養(yǎng)基及 EPCs在非接觸共培養(yǎng)體系里對 MSCs增殖的影響。
方法:1.小鼠骨髓細胞經(jīng)改良差時貼壁法分離,以48 h為時間點,48 h內貼壁細胞傳至3代后行成骨、成軟骨、成脂分化誘導實驗,流式細胞術(FCM)檢測其表面標記;48 h后收集未貼壁細胞,傳至3代后行血管形成實驗,傳至5代后行 C
2、D31免疫熒光細胞染色實驗,F(xiàn)CM檢測其表面標記。
2.將 MSCs分為0 EPC-CM組(采用 LG-DMEM培養(yǎng))、50% EPC-CM組(采用50% EPC-CM+50% LG-DMEM培養(yǎng))和100% EPC-CM組(采用100%EPC-CM培養(yǎng))。
3.取第3代 MSCs和 EPCs,按1:1的細胞比例接種入 Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)中,以下室接種 MSCs,上室接種 EPCs為實驗組。同時設置相同密度
3、單純MSCs接種于下室為對照組。采用 MTT比色法和 EdU熒光標記法檢測 MSCs對 EPCs增殖能力的影響。
結果:1.FCM檢測第3代 MSCs高表達 Sca-1、CD29,低表達 CD45、CD11b;經(jīng)誘導可向成骨、成軟骨、成脂方向分化。FCM檢測第3代 EPCs高表達 CD34、CD133和 VEGFR2;在鋪有基質膠的96孔培養(yǎng)板中可形成血管樣結構。第5代48 h后貼壁細胞特異性表面抗原 CD31呈陽性表達。
4、r> 2.MTT比色法結果顯示與對照組相比較,50% EPC-CM組和100% EPC-CM組 MSCs增殖能力明顯增強,且呈濃度依賴性(P<0.05)。
3.MTT比色法和 EdU熒光標記法結果顯示與對照組相比較,實驗組 MSCs的增殖能力在72 h后顯著增強( P<0.05);處于 DNA合成期的細胞比例也顯著增多( P<0.01)。
結論:利用差速貼壁法可同時分離純化擴增 MSCs和 EPCs,EPC-CM能
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 血管內皮前體細胞對間充質干細胞分化潛能的影響.pdf
- 骨髓間充質干細胞促進血管內皮前體細胞增殖的機制研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞對炎癥時血管內皮細胞TM表達的影響.pdf
- 細胞間直接接觸對骨髓間充質干細胞分化為血管內皮細胞的作用
- 剪應力和血管內皮生長因子對人骨髓間充質干細胞向血管內皮細胞分化的影響.pdf
- 人骨髓間充質干細胞向血管內皮細胞誘導的研究.pdf
- 皮膚間充質干細胞向血管內皮細胞分化的初步研究.pdf
- 脂肪間充質干細胞促進血管內皮細胞功能活性的機制研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞向血管內皮細胞誘導分化的實驗研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞誘導分化為血管內皮樣細胞的實驗研究.pdf
- 人骨髓間充質干細胞(MSCs)體外誘導分化成血管內皮細胞能力的研究.pdf
- 骨髓間充質干細胞促進球囊損傷后血管內皮修復.pdf
- 大鼠脂肪間充質干細胞誘導分化為血管內皮細胞的實驗研究.pdf
- 間充質干細胞種植血管內支架促支架再內皮化的研究.pdf
- 人嗅黏膜間充質干細胞向血管內皮細胞定向分化的研究.pdf
- 骨髓內皮祖細胞和間充質干細胞對動脈粥樣硬化血管內皮的修復作用.pdf
- 人腦脊液對人類脂肪間充質干細胞及胎兒神經(jīng)前體細胞增殖、凋亡及遷移特性的影響.pdf
- 人骨髓間充質干細胞體外向血管內皮細胞誘導分化的研究.pdf
- PSMB5對人骨髓間充質干細胞增殖能力的影響.pdf
- 血管內皮祖細胞促進骨髓間充質干細胞向成骨細胞分化的實驗研究.pdf
評論
0/150
提交評論