蜂產(chǎn)品中生物堿的分布與變化規(guī)律研究.pdf

1、技術(shù)性貿(mào)易壁壘已成為世界各國(guó)出口貿(mào)易發(fā)展的主要障礙。近些年來(lái)，隨著世界范圍內(nèi)蜂產(chǎn)品中生物堿檢出事件的頻頻曝光，蜂產(chǎn)品中新興的質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)因子—生物堿成為了新的研究熱點(diǎn)。但我國(guó)還尚未對(duì)國(guó)內(nèi)蜂產(chǎn)品市場(chǎng)（包括國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的蜂產(chǎn)品以及進(jìn)口蜂產(chǎn)品）進(jìn)行生物堿的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以及監(jiān)督預(yù)警。因此，國(guó)內(nèi)消費(fèi)者可能面臨生物堿潛在的健康威脅，蜂產(chǎn)品的出口貿(mào)易也存在潛在的貿(mào)易壁壘制約。本研究的目的是建立蜂產(chǎn)品中（蜂蜜和蜂花粉）生物堿（吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿）

2、的快速、可靠的分析方法，并對(duì)我國(guó)含有吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿的蜜源植物分布規(guī)律進(jìn)行初步探索，之后對(duì)吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿在蜂蜜采收后存放、加工和貯藏過(guò)程中的變化規(guī)律進(jìn)行研究。以此來(lái)為國(guó)內(nèi)蜂產(chǎn)品市場(chǎng)中的生物堿的監(jiān)測(cè)預(yù)警提供理論依據(jù)，規(guī)范蜂產(chǎn)品市場(chǎng)，滿足人們食用優(yōu)質(zhì)和安全的蜂產(chǎn)品需求，并有利于積極應(yīng)對(duì)和破除發(fā)達(dá)國(guó)家設(shè)置的技術(shù)壁壘。
　　本研究主要分為三個(gè)部分，第一部分分別建立了測(cè)定蜂蜜和蜂花粉中的吡咯里西啶生物堿和異

3、喹啉類生物堿的分散固相萃取-高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(QuEChERS-HPLC-MS/MS)。測(cè)定吡咯里西啶生物堿時(shí)，樣品經(jīng)Zn粉還原，乙腈提取，乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)吸附劑凈化，HPLC-MS/MS測(cè)定;測(cè)定異喹啉生物堿時(shí)無(wú)需還原步驟，提取液直接進(jìn)行分散固相萃取，凈化，上機(jī)測(cè)定。結(jié)果表明:在0.1-100μg/L范圍內(nèi)，10種生物堿的相關(guān)系數(shù)(R2)均大于0.99;在1-100μg/kg的添加水平下，所有生物堿的基質(zhì)回收率均

4、在70％-110％之間;10種生物堿日內(nèi)精密度小于15％，日間精密度小于20％;方法檢出限和定量限分別為0.3μg/kg和1.0μg/kg。本方法定性定量快速準(zhǔn)確，穩(wěn)定可靠，可用于蜂產(chǎn)品中吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿的定性定量分析。
　　第二部分對(duì)國(guó)內(nèi)主要市售品種的蜂蜜和蜂花粉以及國(guó)外主要市售蜂蜜品種進(jìn)行吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿的分析測(cè)定。結(jié)果顯示:國(guó)內(nèi)的蜂蜜和蜂花粉中的兩類生物堿檢出率和檢出含量較低，而進(jìn)口蜂蜜的檢出

5、率和含量明顯高于國(guó)內(nèi)蜂蜜，并且主要是石松胺和藍(lán)薊定生物堿檢出，檢出率為分別54％，40％，且最高檢出含量分別為177.0μg/kg和177.6μg/kg;進(jìn)口蜂蜜同一樣品中會(huì)有多種吡咯里西啶生物堿的存在，最多達(dá)4種;計(jì)算各生物堿的總和可知，進(jìn)口蜂蜜樣品中的吡咯里西啶生物堿最高含量達(dá)226.1μg/kg;從蜜種來(lái)看，麥盧卡蜂蜜和雜花蜜檢出率較高;從產(chǎn)地來(lái)看，新西蘭的吡咯里西啶生物堿含量較高。實(shí)驗(yàn)證明了國(guó)內(nèi)蜂蜜和蜂花粉檢出風(fēng)險(xiǎn)較小，消費(fèi)者食

6、用也更為健康和安全。而進(jìn)口蜂蜜檢出風(fēng)險(xiǎn)較大，有必要對(duì)其進(jìn)行監(jiān)督和預(yù)警。
　　第三部分對(duì)蜂蜜采收后露天存放、加工和貯藏等3個(gè)環(huán)節(jié)的溫度和時(shí)間兩個(gè)因素進(jìn)行吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿的變化規(guī)律研究。研究結(jié)果表明，兩類生物堿在40℃露天存放12周內(nèi)濃度基本沒(méi)變化，在50℃加工12小時(shí)內(nèi)含量也無(wú)明顯降低，在25℃貯藏6個(gè)月內(nèi)含量仍無(wú)明顯降低，說(shuō)明吡咯里西啶生物堿和異喹啉類生物堿在上述3個(gè)環(huán)節(jié)中非常穩(wěn)定，很難降解。因此，對(duì)于檢出風(fēng)險(xiǎn)高的