EPO對(duì)宮內(nèi)感染腦白質(zhì)損傷新生大鼠腦組織MBP、CD68表達(dá)的影響及神經(jīng)行為學(xué)觀察.pdf

1、目的:探討重組人促紅細(xì)胞生成素(recombinant human erythropoietin，rhEPO)對(duì)宮內(nèi)感染導(dǎo)致的腦白質(zhì)損傷(white matter damage，WMD)新生大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用。
　　方法:25只受孕Wistar大鼠，按4∶1隨機(jī)分為感染組(n=20)、非感染組(n=5)。孕15天感染組腹腔注射脂多糖300ug/Kg一次，建立宮內(nèi)感染動(dòng)物模型;非感染組腹腔注射等量生理鹽水。觀察兩組大鼠早產(chǎn)率、平均每

2、胎活產(chǎn)數(shù)及仔鼠出生體重。孕鼠分娩后取胎盤組織行病理檢查。感染組中早產(chǎn)鼠及足月仔鼠分別生后即刻隨機(jī)取6只灌注取腦行HE染色，去除其它早產(chǎn)鼠后將剩余仔鼠隨機(jī)分為EPO組（n=49，生后即刻腹腔注射5000IU/Kg rhEPO）和感染對(duì)照組（n=49，生后即刻腹腔注射等量生理鹽水）;非感染組均為足月分娩，取新生鼠49只作為正常對(duì)照組(n=49，生后即刻腹腔注射等量生理鹽水)。每組分別于生后1、3、7天各組隨機(jī)選取10只灌注取腦，石蠟包埋，切

3、片后行髓鞘堿性蛋白(myelin basicprotein，MBP)、CD68免疫熒光染色，生后30天利用曠場試驗(yàn)、懸吊試驗(yàn)、斜坡試驗(yàn)及拒俘試驗(yàn)進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)檢測。
　　結(jié)果:
　　1、一般情況:感染組有3只孕鼠提前分娩（孕22天前分娩，共產(chǎn)19只仔鼠），早產(chǎn)分娩率為15％;共獲得114只足月仔鼠，隨后有10只死亡，存活率為91.22％。感染組平均每胎活產(chǎn)數(shù)及仔鼠出生體重較非感染組均明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05

4、)。
　　2、胎盤病理檢測:感染組孕鼠胎盤病理檢測可見胎盤內(nèi)血管明顯充血、水腫，并有大量中性粒細(xì)胞浸潤。
　　3、腦HE染色:早產(chǎn)鼠腦白質(zhì)結(jié)構(gòu)疏松化明顯，可見神經(jīng)元呈核小、體積小及少突起的欠分化形態(tài);感染組足月鼠腦白質(zhì)出現(xiàn)染色淡、結(jié)構(gòu)疏松化改變;神經(jīng)纖維粗細(xì)不均、走向紊亂;非感染組仔鼠腦組織結(jié)構(gòu)清晰。
　　4、MBP免疫熒光染色:感染對(duì)照組、EPO組及正常對(duì)照組新生1、3日齡大鼠腦組織未見明顯MBP染色，7日齡感染對(duì)照

5、組、EPO組與正常對(duì)照組比較，MBP表達(dá)水平明顯下降，各組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); EPO組較感染對(duì)照組MBP表達(dá)水平明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　5、CD68免疫熒光染色:各組新生1日齡大鼠腦組織未見明顯CD68染色，3、7日齡感染對(duì)照組、EPO組與正常對(duì)照組比較，CD68表達(dá)水平明顯升高，各組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); EPO組較感染對(duì)照組CD68表達(dá)水平顯著下降，差異具有統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　6、神經(jīng)行為學(xué)檢測:感染對(duì)照組、EPO組較正常對(duì)照組，各項(xiàng)神經(jīng)行為學(xué)檢測得分顯著降低，各組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);EPO組各項(xiàng)神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分顯著高于感染對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、宮內(nèi)感染可導(dǎo)致孕鼠早產(chǎn)、仔鼠低出生體重及仔鼠低存活率。
　　2、腹腔注射LPS后可出現(xiàn)宮內(nèi)感染相應(yīng)的胎盤病理改變,成功建立孕鼠宮內(nèi)感染模型。