不同劑量X線輻照對(duì)大鼠周圍神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景和目的:周圍神經(jīng)損傷后的治療與康復(fù),是醫(yī)學(xué)界長(zhǎng)期以來(lái)較為棘手的一個(gè)難題。近年來(lái)醫(yī)學(xué)界一直在積極探索促進(jìn)周圍神經(jīng)再生及加速功能恢復(fù)的治療方法。物理因子療法廣泛而有效的治療與康復(fù)作用,已被多年的臨床實(shí)踐所證實(shí)。電離輻照作為物理因子家族中的一員,其治療作用的報(bào)導(dǎo)越來(lái)越多,但關(guān)于 X線電離輻照對(duì)周圍神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生及功能恢復(fù)影響的研究報(bào)導(dǎo)較少。本研究擬通過(guò)不同劑量X線輻照干預(yù)周圍神經(jīng)斷裂損傷動(dòng)物模型,觀察不同劑量 X線輻照對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損

2、傷后的神經(jīng)再生和功能恢復(fù)的影響,以期為周圍神經(jīng)再生修復(fù)提供新的方法及理論依據(jù)。
　　方法:選取兩月齡Sprague-Dawley大鼠80只,體重200g~250g左右,隨機(jī)分為5組,每組16只。暴露大鼠左側(cè)坐骨神經(jīng),顯微剪刀橫斷神經(jīng)后,采用神經(jīng)外膜端端吻合法修復(fù)斷裂神經(jīng),恢復(fù)神經(jīng)的連續(xù)性。造模成功后24 h,分別給予0Gy、0.2Gy、1Gy、7Gy、14Gy5個(gè)不同劑量的X線單次局部輻照。輻照后每周觀察大鼠足部潰瘍、步態(tài)、足部感

3、覺、展爪反射等大體情況;輻照后第4、8、12周測(cè)定大鼠坐骨神經(jīng)功能指數(shù);輻照后第12周測(cè)定神經(jīng)電生理從而評(píng)價(jià)神經(jīng)功能恢復(fù)情況;輻照后第12周顯微鏡下觀察神經(jīng)吻合處局部形態(tài);輻照后第12周行組織學(xué)和免疫組織學(xué)觀察;輻照后第12周行透射電鏡檢查觀察神經(jīng)超微結(jié)構(gòu)變化,從形態(tài)學(xué)和功能學(xué)兩方面評(píng)估不同劑量X線輻照對(duì)大鼠周圍神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生及功能恢復(fù)影響。
　　結(jié)果:
　　1、大體形態(tài)觀察:(1)足部潰瘍:第1~2周,各組大鼠左后足均

4、出現(xiàn)足跟部潰瘍;1Gy組潰瘍愈合早于其他各組;0Gy組、0.2Gy組、7Gy組及14Gy組潰瘍愈合時(shí)間基本一致。(2)足態(tài):第1周各組均出現(xiàn)造模側(cè)肢體的小腿和足部肌肉完全癱瘓,跖下垂、趾屈曲,行走時(shí)造模側(cè)的下肢在地上呈拖行狀,足趾完全并攏;1Gy組足態(tài)恢復(fù)早于且快于其他各組;0Gy組、0.2Gy組及7Gy組足態(tài)恢復(fù)時(shí)間基本一致,至12周時(shí),14Gy組大鼠足態(tài)恢復(fù)不明顯。(3)足部感覺恢復(fù)及展爪反射:術(shù)后第1~2周,針刺所有大鼠左后肢均無(wú)

5、肢體回縮及展爪反射形成。1Gy組肢體回縮及展爪反射開始恢復(fù)時(shí)間早于其他各組,且相對(duì)其他各組較早恢復(fù)正常;7Gy組肢體回縮及展爪反射開始恢復(fù)時(shí)間早于0Gy組、0.2Gy組及14Gy組,且相對(duì)這三組較早恢復(fù)正常;0Gy組、0.2Gy組及14Gy組肢體回縮及展爪反射開始恢復(fù)時(shí)間基本一致,但至第12周時(shí),0Gy組、0.2Gy組肢體回縮及展爪反射恢復(fù)均較14Gy組好。
　　2、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(SFI):術(shù)后第2周,由于各組大鼠均出現(xiàn)患足跖

6、下垂、趾屈曲,各組SFI值無(wú)法測(cè)量計(jì)算。術(shù)后第4周到12周SFI逐漸恢復(fù),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,術(shù)后第4、8周,各組SFI較前均有所好轉(zhuǎn),1Gy、7Gy組SFI恢復(fù)率均優(yōu)于0Gy組、0.2Gy組、14Gy組(P<0.05),1Gy組、7Gy組之間SFI恢復(fù)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。0Gy組、0.2Gy組及14Gy組之間SFI恢復(fù)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);術(shù)后第12周,SFI較前均有所好轉(zhuǎn),0Gy組、0.2Gy組、1Gy、7G

7、y組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但各組SFI恢復(fù)均優(yōu)于14G組(P<0.05)。
　　3、神經(jīng)電生理檢測(cè):1Gy組、7Gy組運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的波幅及傳導(dǎo)速度高于0Gy組、0.2Gy組及14Gy組(P<0.05);1Gy組運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的波幅及傳導(dǎo)速度高于7Gy組(P<0.05);0Gy組、0.2Gy組運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的波幅及傳導(dǎo)速度高于14Gy組(P<0.05);0Gy組與0.2Gy組之間差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。
　　4、顯微

8、鏡下吻合處局部神經(jīng)形態(tài):1Gy組神經(jīng)損傷處與周圍組織粘連較其他各組輕;7Gy組神經(jīng)損傷處與周圍組織粘連程度輕于0Gy組、0.2Gy組及14Gy組;0Gy組、0.2Gy組及14Gy組神經(jīng)損傷處與周圍組織粘連程度相當(dāng)。
　　5、組織學(xué)和免疫組織學(xué)觀察:1Gy組軸突腫脹、髓鞘結(jié)構(gòu)與周圍組織粘連程度及S-100蛋白表達(dá)分布均優(yōu)于其他各組;7Gy組軸突腫脹、髓鞘結(jié)構(gòu)與周圍組織粘連程度及S-100蛋白表達(dá)分布均優(yōu)于0Gy組、0.2Gy組及14

9、Gy組;0Gy組和0.2Gy組組織學(xué)和免疫組織學(xué)觀察結(jié)果基本一致且均優(yōu)于14Gy組。
　　6、透射電鏡觀察:1Gy組每高倍鏡視野下神經(jīng)纖維數(shù)量、軸突直徑、髓鞘形態(tài)、神經(jīng)纖維形態(tài)結(jié)構(gòu)均優(yōu)于其他各組;7Gy組每高倍鏡視野下神經(jīng)纖維數(shù)量、軸突直徑、髓鞘厚度均優(yōu)于0Gy組、0.2Gy組及14Gy組,但7Gy組、14Gy組與0Gy組、0.2Gy組相比均出現(xiàn)明顯板層分離及空泡化,結(jié)構(gòu)不清晰;0Gy組、0.2Gy組透射電鏡觀察結(jié)果基本一致且均優(yōu)