新城疫病毒差異性誘導肝癌細胞死亡的機制探討.pdf

1、新城疫病毒(NewcastleDiseaseVirus，NDV)是一種能特異性感染并有效殺傷腫瘤細胞卻不能在正常細胞中復制的副粘液病毒科的禽類病毒。臨床研究表明，NDV作為一種溶瘤病毒具有很好的安全性。只有少數(shù)幾例報道NDV的感染能導致輕度至中度的結膜炎、喉炎和流感樣癥狀，并且均為可迅速康復的自限性疾病。NDV除了可以直接殺傷腫瘤細胞外，它還可以通過改變腫瘤細胞免疫原性、誘導機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生多種細胞因子殺傷腫瘤細胞，是一種具有很大發(fā)展前

2、景的抗癌生物制劑。
　　原發(fā)性肝癌是全球常見的惡性腫瘤之一，該腫瘤具有惡性度高、病情發(fā)展快，預后性差等特點而導致其死亡率高。目前肝癌治療主要以手術切除為主，此外還聯(lián)合化學藥物治療、放射治療、免疫治療等治療方法。然而這些治療方法毒副作用大，療效欠滿意，晚期肝癌患者容易產(chǎn)生抗腫瘤藥物耐藥性，因此研發(fā)新型的對于各種類型的肝癌細胞均具有高效高特異性的個性化治療方法刻不容緩。
　　本文主要探討了NDV處理不同分化程度的肝癌細胞系所誘導

3、的差異性殺傷作用的分子機制。首先建立了一套肝癌細胞培養(yǎng)純化NDV的系統(tǒng)，擴增得到高毒力高滴度的新城疫病毒;然后用純化的病毒分別感染不同的肝癌細胞系，發(fā)現(xiàn)肝癌細胞的分化程度與對NDV感染敏感性相關。對腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（TumorNecrosisFactor-relatedApoptosis-inducingLigand，TRAIL）敏感的高分化肝癌細胞LH86和HLCZ03對NDV感染相對不敏感;而NDV對TRAIL耐受的低分

4、化肝癌細胞Huh7和HLCZ01感染敏感性強，能在感染早期發(fā)揮高效的溶瘤作用。對凋亡和抗病毒途徑中相關基因的表達檢測結果發(fā)現(xiàn):在NDV感染后期不同肝癌細胞系均能誘導IFN-β大量表達，表明NDV的感染能誘導這些肝癌細胞激活干擾素信號通路途徑，產(chǎn)生抗病毒免疫反應;在高分化的肝癌細胞中，NDV早期感染能誘導IFN-β水平上升，提示可能通過早期清除細胞內(nèi)病毒的方式，延緩NDV的復制速率。另外，高分化肝癌細胞中ISG12a和RIG-Ⅰ的高表達水