土壤拮抗放線菌的分離及其抗菌活性篩選.pdf

1、本文以高氏一號培養(yǎng)基為分離培養(yǎng)基，對從6個省份采集的43份土樣進(jìn)行放線菌的分離，經(jīng)過菌株純化，共得到放線菌422株。主要研究結(jié)果如下： 以常見植物病原真菌和細(xì)菌為指示菌從分離的422株放線菌中篩選出28株可代謝抗細(xì)菌活性物質(zhì)的菌株，其中N74、N179、N331、N393菌株發(fā)酵液對小麥根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)等12種植物病原真菌也具有顯著的抑制作用。離體條件下，N74、N179發(fā)酵液對供試真菌菌絲

2、生長的抑制中濃度(ECso 1)均小于23mL·L-1，N331、N393對供試真菌菌絲生長的ECso均小于15mL·L-1。對玉米彎孢病菌(Curvulavia lunata)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、小麥根腐病菌(B．sorokiniana)、黃瓜霜霉病菌(Pseudoperonospora cubens)等4種病原真菌孢子萌發(fā)亦有顯著的抑制作用，其中N331抑制黃瓜霜霉病菌孢子萌發(fā)的EC50為7.5m

3、L·L-1；N393抑制黃瓜霜霉病菌和西瓜枯萎病菌孢子萌發(fā)的EC50分別為8.9mL·L-1和1.8mL·L-1。盆栽實驗結(jié)果表明：N74、N179、N331、N393菌株發(fā)酵液對黃瓜霜霉病具有不同程度的保護(hù)作用和治療作用，分別為26.9％和22.6％、44.6％33.9％、97.4％和83-3％、85.6％和58.3％。 N74、N179、N331和N393菌株轉(zhuǎn)代穩(wěn)定性及發(fā)酵液穩(wěn)定性試驗結(jié)果表明，這4株放線菌發(fā)酵液均具有較好

4、的遺傳穩(wěn)定性，連續(xù)轉(zhuǎn)接9代后，它們發(fā)酵液活性沒有明顯的變化。N74菌株發(fā)酵液60℃處理1h后對細(xì)菌的抑菌活性開始下降，90℃處理1h后則不再對細(xì)菌具有抑制活性，同時對玉米彎孢病菌菌絲生長抑制活性亦顯著降低；N331、N179和N393發(fā)酵液100℃處理1h后對枯草芽孢桿菌抑菌圈直徑和玉米彎孢病菌菌絲生長抑制率仍然保持穩(wěn)定。所有菌株發(fā)酵液中有效成分酸堿穩(wěn)定性均較差，在pH為5～9時比較穩(wěn)定。 采用經(jīng)典分類鑒定方法對N74，N179

5、，N331，N393菌株種屬地位進(jìn)行了研究。結(jié)果認(rèn)為：N74可能是鏈霉菌屬白孢類群稀疏鏈霉菌稀疏變種(Streptomyces sparsogenes var．sparsogenes)的近緣種或變種，N17可能是鏈霉菌屬白孢類群秋吉鏈霉菌(Stretomyces．a(chǎn)kiyoshiensis)的近緣種或變種，N331菌株可能是(Micromonos pora pallida)的近緣種或變種，N393可能是鏈霉菌屬金色類群小小鏈霉菌(Str