低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)在繼發(fā)性脊髓損傷中的時序性表達及其意義.pdf

1、目的: 繼發(fā)性脊髓損傷的機制及其治療的研究越來越受到大家的關(guān)注。低氧誘導(dǎo)因子—1α是20世紀90年代對氧感受器—信號傳導(dǎo)—效應(yīng)基因的低氧反應(yīng)通路的重要發(fā)現(xiàn)。多數(shù)學(xué)者認為HIF—1α是誘導(dǎo)低氧基因和維持細胞氧內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的核心因子，可以調(diào)節(jié)能量代謝，血管形成，細胞凋亡，細胞分化，基質(zhì)合成等相關(guān)基因的表達。本實驗通過觀察大鼠繼發(fā)性脊髓損傷中低氧誘導(dǎo)因子—1α(HIF—1α)的表達規(guī)律，探討其在繼發(fā)性脊髓損傷發(fā)生發(fā)展過程中的作用。

2、 方法: SD大鼠66只，隨機分為對照組、假損傷組與各實驗組(損傷后1h、3h、6h、12h、1d、2d、3d、7d、14d)。實驗組建立大鼠靜壓脊髓損傷模型，損傷大鼠T10脊髓，假損傷組僅行椎板切除。各組大鼠到各相應(yīng)時點處死，40g/L多聚甲醛灌注固定，取損傷段脊髓約10.0mm，采用HE染色和免疫組化染色。檢測繼發(fā)性脊髓損傷中脊髓組織的病理變化情況和傷后不同時間HIF—1α的時序性表達情況。結(jié)果判定：以胞漿或胞核出現(xiàn)棕黃色

3、顆粒為陽性。每張切片任選10個視野，計數(shù)陽性細胞數(shù)。數(shù)據(jù)用SPSSV11軟件包處理。 結(jié)果: 肉眼可見大鼠脊髓損傷局部組織充血。鏡下可見SCI后3～6h損傷局部神經(jīng)元核固縮，胞體縮小，胞質(zhì)深伊紅染色。傷后1～3d，軸突腫脹，出現(xiàn)空泡，白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)髓鞘散亂、崩解破裂。傷后3～7d膠質(zhì)細胞增生明顯，可見衛(wèi)星現(xiàn)象及鬼影細胞。傷后14d，損傷段脊髓變細部分灰質(zhì)崩解壞死，可見囊腔形成。正常脊髓組織中極少能檢測到HIF—1α細胞，假手

4、術(shù)組稍有增多，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。傷后3h，HIF—1α陽性產(chǎn)物開始增多，主要在脊髓前角神經(jīng)元和少量膠質(zhì)細胞中表達；傷后1天達峰值，陽性產(chǎn)物可見于脊髓神經(jīng)元、膠質(zhì)細胞、室管膜細胞及間質(zhì)內(nèi)的血管內(nèi)皮細胞等，其亞細胞定位于胞漿和胞核。HIF—1α免疫陽性細胞數(shù)在傷后1～3h期間一直維持在一個較高水平，此后逐漸減少，傷后14d時，僅可見于少量白質(zhì)中的膠質(zhì)細胞。各實驗組之間有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。 結(jié)論: 脊髓