蘇太豬肌內(nèi)脂肪含量cDNA-AFLP研究.pdf

1、肌內(nèi)脂肪(IMF)含量是肉質(zhì)的一個非常重要的指標(biāo)，直接影響豬肉的嫩度和風(fēng)味。隨著IMF含量的增加會使肉質(zhì)的嫩度和多汁性得到相應(yīng)改進(jìn).大量的研究結(jié)果表明，2％～3％的肌內(nèi)脂肪含量是新鮮肉品的一個理想標(biāo)準(zhǔn)，長期以來豬的遺傳育種工作一直將提高瘦肉率或降低背膘厚作為主要目標(biāo)之一，由于肌內(nèi)脂肪含量與瘦肉率之間呈負(fù)相關(guān)，因此，這種選育方式的最終結(jié)果是導(dǎo)致肌內(nèi)脂肪含量的下降，以及豬肉品質(zhì)的下降。另一方面，那些未經(jīng)選育或選育程度較低的地方豬種具有較高的

2、肌內(nèi)脂肪含量，肉的品質(zhì)也較好，但瘦肉率卻普遍較低.因此如何在瘦肉率不降低或背膘厚不增加的前提下，對已有的高瘦肉率豬種選育，提高肌內(nèi)脂肪含量是目前豬種選育的一個主要方向.目前，從分子水平上進(jìn)行豬品種選育已成為可能，但對于肌內(nèi)脂肪沉積的分子調(diào)節(jié)機(jī)制了解還不清楚。本文旨在通過cDNA擴(kuò)增片段長度多態(tài)性(cDNA-AFLP)分離與肌內(nèi)脂肪含量差異表達(dá)相關(guān)的基因。其目的在于尋找參與肌內(nèi)脂肪沉積調(diào)控的相關(guān)基因，并為豬的肌內(nèi)脂肪性狀選育提供候選標(biāo)記基

3、因，為今后豬種選育工作提供科學(xué)依據(jù)。 從平均肌內(nèi)脂肪含量為2.72±0.13％的90頭180日齡蘇太豬中各選取平均肌內(nèi)脂肪含量差異極顯著(P<0.01)的最高(5.79±0.35％)和最低(0.98±0.09％)各6頭構(gòu)建RNA池。采用cDNA擴(kuò)增片段長度多態(tài)性(cDNA-AFLP)檢測兩組基因間的差異表達(dá)。本實驗用72對EcoR I/TaqI引物組合檢測到200多條差異條帶，回收克隆測序獲得15條EST序列，通過NCBI比對發(fā)

4、現(xiàn)有4條為已知序列，其余為未知序列。 4條已知序列中，有一條為豬的NADH4基因，經(jīng)測序比對發(fā)現(xiàn)肌內(nèi)脂肪含量高組多了一個EcoR I限制性酶切位點(diǎn)，為了驗證是否存在酶切位點(diǎn)進(jìn)行了PCR-RFLP，結(jié)果發(fā)現(xiàn)肌內(nèi)脂肪高組存在這一酶切位點(diǎn)，而肌內(nèi)脂肪含量低組沒有發(fā)現(xiàn)這一酶切位點(diǎn)。為了進(jìn)一步的驗證NADH4基因與肌內(nèi)脂肪之間的關(guān)系，從90個個體中選取肌內(nèi)脂肪最高和最低的各15頭組成肌內(nèi)脂肪含量差異顯著的兩組(p<0.05)，肌內(nèi)脂肪平均