枯草芽孢桿菌B908發(fā)酵工藝優(yōu)化研究.pdf

1、枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis(Ehrenberg)CohnB908是中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病害生物防治研究室從水稻根際土壤中分離獲得的有益菌株，它對(duì)水稻紋枯病、棉花枯萎病、小麥赤霉病等多種植物病害有明顯的防治效果。該芽孢桿菌已經(jīng)制成制劑而應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。制劑中的芽孢含量是影響制劑應(yīng)用效果的關(guān)鍵因素。本研究的目的是通過優(yōu)化發(fā)酵工藝，提高發(fā)酵液中芽孢含量，降低生產(chǎn)成本，提高制劑的生防效果。 本項(xiàng)研究收集到應(yīng)用于芽孢桿菌發(fā)酵

2、的培養(yǎng)基配方16種，通過搖床培養(yǎng)篩選出較適宜于枯草芽孢桿菌B908發(fā)酵的培養(yǎng)基配方(玉米粉10g，葡萄糖5g，豆餅粉15g，魚粉5g，CaCO35g，(NH4)2SO41g，K2HPO40.3g，MgSO4·7H2O0.2g，MnSO4·H2O0.2g，水1000ml。)作為下一步優(yōu)化的初始發(fā)酵培養(yǎng)基。并應(yīng)用Plackett-Burman設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法設(shè)計(jì)相結(jié)合的優(yōu)化方法，確定了該培養(yǎng)基中影響枯草芽孢桿菌B908發(fā)酵液含菌量的主要因

3、子及其最佳配比：玉米粉(13.0g/L)、CaCO3(7.0g/L)和豆餅粉(20.5g/L)。 發(fā)酵培養(yǎng)基配方確定后，在搖床條件下，通過對(duì)溫度、初始pH值、初始接種量、裝液量、搖床轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件的摸索，確定最佳發(fā)酵條件如下：裝液量為500ml三角瓶中裝50ml培養(yǎng)基，初始pH值為7.0-7.2，接菌量為2％(即在每100ml的液體培養(yǎng)基中接入2ml濃度為1×108個(gè)/ml的芽孢懸浮液)，培養(yǎng)溫度為30℃，搖床轉(zhuǎn)速為200rpm