高血壓心血管重構(gòu)過程中細(xì)胞增殖與凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該研究應(yīng)用病理形態(tài)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)及分子生物學(xué)方法和免疫組織化學(xué)技術(shù),動(dòng)態(tài)觀察不同周齡自發(fā)性高血壓大鼠心肌、血管平滑肌細(xì)胞增生及凋亡變化情況,同時(shí)檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax的表達(dá)以及其蛋自產(chǎn)物形成情況.并觀察血管緊張素IIATI受體桔抗劑Losartan和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑Enalapril對(duì)SHR心肌和血管平滑肌上述指標(biāo)的影響,從增生與凋亡角度對(duì)高血壓心血管重構(gòu)機(jī)制以及Losartan、Enalapril的靶器官保護(hù)機(jī)制進(jìn)行

2、探討,為臨床高血壓病的防治提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù).全文分兩部分,主要內(nèi)容及結(jié)果如下:第一部分心肌細(xì)胞增殖與凋亡在高血壓心臟肥大過程中的作用:洛沙但、依那普利降壓治療對(duì)SHR心肌細(xì)胞增殖與凋亡的影響目的:探討心肌細(xì)胞增殖與凋亡在高血壓心臟肥大過程中的作用;動(dòng)態(tài)觀察血管緊張素AT<,1>-R阻滯劑洛沙坦和 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑依那普利降壓治療對(duì)SHR心肌細(xì)胞增殖與凋亡的影響.方法70只12周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)分為洛沙但治療組(S

3、HR- L)、依那普利治療組(SHR-E)和對(duì)照組(SHR- C),兩治療組從12周齡開始分別給予洛沙坦(30mg.kg<'-1>d<'-1>)和依那 普利(30mg.kg<'-1>d<'-1>)口服降壓治療4~12周:對(duì)照組正常飲食,此外,14只雄性正常血壓大鼠(WKY)也被用作對(duì)照.測(cè)定各組收縮壓、心臟肥厚指數(shù),用未端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP未端標(biāo)記法(TUNEL)和透射電鏡技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡,用RT- PCR檢測(cè)凋亡相關(guān)基

4、因Bax、Bcl- 2表達(dá);同時(shí)用免疫組化技術(shù)檢狽、心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax 、Bcl- 2和細(xì)胞增殖核抗原(proliferatingceIlnuclearantigen,PCNA )的表達(dá).結(jié)論(1)SHR 心臟肥大過程中心肌細(xì)胞存在凋亡與增殖失衡,凋亡而非增殖可能是心臟肥大形成的主要原因和機(jī)制之一,一定水平的凋亡是維持正常心臟結(jié)構(gòu)和功能所必需的.(2)SHR心 臟臟大過程中心肌細(xì)胞凋亡呈動(dòng)態(tài)變化,存在一個(gè)凋亡時(shí)間窗.(3)凋亡促

5、進(jìn)基因Bax及其蛋白和抑制基因Bcl-2及其蛋白共同參與心肌細(xì)胞凋亡的調(diào)控.(4)洛沙坦、依那普利降壓治療均使SHR心臟肥明厚顯逆轉(zhuǎn),對(duì)心肌細(xì)胞凋亡起抑制或促進(jìn)的雙向性作用,即當(dāng)SHR心肌細(xì)胞凋亡過多時(shí),表現(xiàn)出凋亡抑制效應(yīng);當(dāng)?shù)蛲霾蛔銜r(shí),表現(xiàn)出促進(jìn)作用,使心肌細(xì)胞凋亡與增殖維持一定的平衡.(5)洛沙坦、依那普利降壓治療對(duì)心肌細(xì)胞調(diào)亡的調(diào)節(jié)主要是通過影響凋亡促進(jìn)基因Bax及其蛋白的表達(dá)獲得;當(dāng)心肌細(xì)胞凋亡不足以維持一定的凋亡與增殖平衡時(shí),

6、Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)也是他們發(fā)揮凋亡調(diào)節(jié)效應(yīng)所必需的機(jī)制之一.第二部分洛沙坦、依那普利降壓治療對(duì)SHR血管平滑肌細(xì)胞凋亡的影響陰滯劑洛沙坦和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑依尋普利降壓治療對(duì)SHR,平滑肌細(xì)胞凋亡的影響.方法70只12周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)分 為洛沙但治療組(SHR- L),依那普利治療組(SHR-E)和對(duì)照組(SHR-C), 兩治療組從12周齡開始分別給予洛沙但30mg.kg<-1>.d<'-1>和依那普利(30m

7、g.kg<-1>.d<'-1>)口服降壓治療4~12周:對(duì)照組正常飲食,此外,14只雄性正常血壓大鼠(WKY)也被用作對(duì)照.測(cè)定各組血壓,用末端脫氧核昔酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP未端標(biāo)記法(TUNEL)和透射電鏡技術(shù)檢測(cè)SHR血管平滑肌細(xì)胞凋仁,并分別用RT- PCR和免疫組化方法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2及其蛋白的表達(dá).結(jié)論(1)細(xì)胞凋亡參與高血壓血管重構(gòu),凋亡不足可能是血管肥厚的主要原因之一.(2)洛沙但.依那普利長(zhǎng)期降壓治療,