山蒼子無(wú)性繁殖技術(shù)的研究.pdf

1、山蒼子作為我國(guó)的能源樹(shù)種，具有很高的經(jīng)濟(jì)開(kāi)發(fā)價(jià)值。本試驗(yàn)以3個(gè)不同種源的山蒼子為基本材料，通過(guò)組織培養(yǎng)各個(gè)環(huán)節(jié)的優(yōu)化、誘導(dǎo)愈傷組織為起始材料，建立山蒼子愈傷組織體系、山蒼子扦插繁殖各個(gè)環(huán)節(jié)的優(yōu)化，對(duì)我國(guó)優(yōu)良的能源樹(shù)種山蒼子進(jìn)行無(wú)性繁殖技術(shù)的研究，對(duì)于提高山蒼子苗木質(zhì)量、縮短育苗周期具有重要的現(xiàn)實(shí)意義，為山蒼子無(wú)性繁殖技術(shù)提供理論和實(shí)踐依據(jù)，同時(shí)也為木本植物的快繁技術(shù)提供參考和借鑒。主要研究結(jié)果如下： 1.山蒼子組織培養(yǎng)。1.1山

2、蒼子外植體消毒處理采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，篩選出0.1％升汞+20％次氯酸鈉組合消毒效果最好，0.1％升汞+20％次氯酸鈉組合消毒時(shí)間分別為10min+5min時(shí)，污染率最低，為最佳的消毒方案。1.2山蒼子初代培養(yǎng)基的篩選采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，考慮不同激素種類和濃度對(duì)山蒼子外植體初代培養(yǎng)的影響，篩選出初代培養(yǎng)基A5：MS+2.0mg/LBA+1.0mg/L，KT+0.3mg/L IBA+蔗糖30g/L，A15：MS+2.5mg/LBA+0.4

3、mg/LIBA+蔗糖30g/L。在初代培養(yǎng)基A5和A15中外植體萌芽快，苗綠，節(jié)間距較大，苗壯，增殖率高。1.3山蒼子防褐變處理分別從外植體處理和在培養(yǎng)基中加入褐變抑制劑2個(gè)方面，進(jìn)行了比較試驗(yàn)。外植體冷處理有一定的降低褐變率的效果，接種前外植體在5℃下冷處理15h的效果最好，褐變率降低了11.67％。接種前在1g/L PVP溶液中切割外植體也能減輕褐變，褐變率降低了10％。接種前在無(wú)菌水中切割外植體，褐變率降低了3.34％。采用完全隨

4、機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在培養(yǎng)基中添加不同的褐變抑制劑，AC控制褐變的效果最好，在培養(yǎng)基中添加0.5g/LAC時(shí)，褐變率從對(duì)照的35％降低了18.89％，能夠較好地控制山蒼子外植體的褐變。1.4不同種源和枝條部位對(duì)山蒼子外植體增殖率的影響采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，篩選出三明種源的枝條梢部在培養(yǎng)過(guò)程中，啟動(dòng)率最高為81.02％，增殖率最高，達(dá)到3.06。三明種源最優(yōu)，其次為將樂(lè)種源，沙縣種源培養(yǎng)的效果最差；不同枝條部位的外楂體啟動(dòng)率和增殖率不同，梢部的啟

5、動(dòng)率和增殖率最高，而后從上到下，啟動(dòng)率和增殖率也隨之下降。1.5不同采集月份對(duì)山蒼子外植體污染率、啟動(dòng)率和增殖率的影響不同月份采集的外植體，污染率、啟動(dòng)率和增殖情況不同，9月、11月是下半年較佳的培養(yǎng)時(shí)間，3月、4月的啟動(dòng)率和增殖率較高，是上半年較佳的培養(yǎng)時(shí)間。1.6山蒼子繼代培養(yǎng)采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，篩選出第一次繼代的最適培養(yǎng)基為MS+1.0mg/LBA+0.5mg/LKT+0.4mg/L，IBA+30g/L蔗糖。二次繼代配方為MS+1.

6、0mg/L BA+0.1mg/L KT+0.4mg/LIBA+30g/L蔗糖+0.5g/L AC。三次繼代的最適培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L BA+0.2mg/L IBA+20g/L蔗糖+0.5g/L AC。1.7山蒼子生根培養(yǎng)和移栽采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，考慮不同生長(zhǎng)素對(duì)山蒼子無(wú)根苗生根的影響。篩選出最佳的生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.8mg/L IBA+0.2mg/L IAA+20g/t，蔗糖。移栽基質(zhì)前期采用沙子，后期移到沙子：黃心土：泥

7、炭土=1:1:1中。 2.山蒼子愈傷誘導(dǎo)、繼代和再生植株采用3種不同的外植體(莖段、嫩葉、葉柄)為愈傷組織的誘導(dǎo)材料，建立山蒼子愈傷組織體系。不同的外植體莖段、葉片、葉柄誘導(dǎo)愈傷組織的難易不同：莖段>葉柄>葉片，當(dāng)年生嫩莖為山蒼子誘導(dǎo)愈傷組織的理想材料。莖段誘導(dǎo)愈傷組織的最適配方為：MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/L BA+1.0mg/L KT+30g/L蔗糖。誘導(dǎo)山蒼子葉片愈傷組織的最適配方為：MS+1.5mg/L

8、 2,4-D+1.0mg/L，BA+0.5mg/L KT+30g/L蔗糖。誘導(dǎo)葉柄愈傷組織的最適配方為：MS+1.5mg/L 2,4-D+1.0mg/L BA+1.0mg/L KT+30g/L蔗糖。山蒼子繼代的最適培養(yǎng)基為：MS+1.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L BA+0.5mg/L IBA+30g/L蔗糖。最佳的誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為：MS+0.5mg/L IBA+0.5mg/L BA+0.5mg/L KT+30g/L蔗糖。

9、 3.山蒼子扦插繁殖三個(gè)種源的平均扦插成活率的高低順序?yàn)樯晨h>將樂(lè)>三明，平均生根率的高低順序?yàn)樯晨h>將樂(lè)>三明，沙縣種源的扦插材料較優(yōu)。河沙的扦插成活率、平均生根率最高，平均根數(shù)最多，平均根長(zhǎng)最長(zhǎng)，在扦插時(shí)選擇河沙為基質(zhì)的效果最佳。不同插穗部分、生根促進(jìn)劑、扦插處理對(duì)山蒼子扦插成活率的影響不同，最佳組合為：根部萌發(fā)條+枝條上段+200mg/L L1生根粉浸泡30min+扦插時(shí)下端切成斜切口。最佳穗條長(zhǎng)度為14cm。穗條直徑為0.3-