FOXE1在大腸癌中的表達(dá)及其功能研究.pdf

1、Forkhead box E1(FOXE1)，又名甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子2，屬于Forkhead box轉(zhuǎn)錄因子家族成員，其編碼基因定位于9q22染色體。FOXE1在胚胎發(fā)育、細(xì)胞生長和分化中扮演著重要角色，近年來的研究發(fā)現(xiàn)其與惡性腫瘤的發(fā)生也有密切關(guān)系，F(xiàn)OXE1被認(rèn)為是甲狀腺乳頭狀癌的易感基因，而在胰腺癌、乳腺癌、皮膚鱗狀細(xì)胞癌、大腸癌中則存在FOXE1基因啟動(dòng)子區(qū)域異常甲基化。然而，F(xiàn)OXE1在大腸癌中的表達(dá)及其在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用目

2、前尚不明確。
　　目的:探討FOXE1在大腸癌中的表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制以及FOXE1基因在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的生物學(xué)作用。
　　方法:用半定量RT-PCR和免疫組化檢測FOXE1在大腸癌細(xì)胞株和大腸癌組織中的表達(dá);用甲基化特異性PCR(MSP)和亞硫酸氫鈉測序法(BGS)檢測FOXE1基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島在這些腫瘤細(xì)胞株和腫瘤組織中的甲基化狀態(tài)。通過體外轉(zhuǎn)染，獲得穩(wěn)定表達(dá)FOXE1的大腸癌細(xì)胞株，觀察FOXE1對細(xì)胞表型的影響，

3、包括細(xì)胞的增殖能力，集落形成能力，細(xì)胞遷移能力，細(xì)胞肌動(dòng)蛋白骨架，細(xì)胞周期，細(xì)胞凋亡等，并通過建立裸鼠皮下種植瘤模型進(jìn)一步觀察FOXE1對腫瘤生長的影響。
　　結(jié)果:FOXE1在大多數(shù)大腸癌細(xì)胞株和大腸癌組織中表達(dá)沉默或降低，在腫瘤細(xì)胞株和腫瘤組織中均能檢測到FOXE1基因啟動(dòng)子區(qū)高度甲基化狀態(tài)。而在正常結(jié)腸粘膜組織中未檢測到。FOXE1蛋白在全部正常結(jié)腸粘膜組織中高表達(dá)，而在大腸癌組織中表達(dá)強(qiáng)度顯著下降，原發(fā)大腸癌組織中僅有25

4、％(32/128)顯示FOXE1高表達(dá)，轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中僅有7.4％(2/27)顯示FOXE1高表達(dá)，F(xiàn)OXE1蛋白表達(dá)降低與大腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及較差的TNM分期顯著相關(guān)。大腸癌細(xì)胞株轉(zhuǎn)染FOXE1后，通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)FOXE1能夠抑制腫瘤細(xì)胞的生長、遷移以及影響細(xì)胞肌動(dòng)蛋白骨架的組裝。
　　結(jié)論:FOXE1在大腸癌中表達(dá)沉默或降低，而FOXE1基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島異常甲基化是導(dǎo)致其在大腸癌中表達(dá)沉默或降低的主要原因。FOXE1在