10-HDA對(duì)G+抑菌活性及機(jī)制的研究.pdf

1、10-羥基-2-癸烯酸（10-HDA）是蜂王漿的標(biāo)志性物質(zhì)，大約占蜂王漿的1.4％~2.0%，其結(jié)構(gòu)式為 HO-CH2-(CH2)6-CH=CH-COOH(C10H18O3)。10-HDA具有抑菌、提高免疫力、抗輻射和降血脂等多種功效。
　　雖然10-HDA對(duì)細(xì)菌具有良好的抑制效果，但對(duì)其抑菌機(jī)理卻是知之甚少。因此，本論文以金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌為實(shí)驗(yàn)菌株，主要從細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)等方面入手，對(duì)10-HDA的抑

2、菌機(jī)理進(jìn)行較為系統(tǒng)的研究。取得的結(jié)果如下：
　　1、10-HDA生物活性的確定
　　為了確定與分析10-HDA的抑菌性能，采用牛津杯法，倍半稀釋法進(jìn)行抑菌性能測(cè)定實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，10-HDA對(duì)多種病原細(xì)菌具有明顯的抑制作用，表現(xiàn)出廣譜抗菌活性，且抑菌效果隨著10-HDA濃度的增加顯著提高。其中，對(duì)金黃色葡萄球菌以及枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度（MIC）均為0.62 mg/mL。
　　2、10-HDA對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜

3、及代謝活力的影響
　　通過對(duì)金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)曲線、細(xì)胞膜通透性、細(xì)胞代謝活力等方面的研究，探討10-HDA對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞膜的作用機(jī)理。結(jié)果表明10-HDA可以破壞金黃色葡萄球菌細(xì)胞的完整性，促使細(xì)胞膜通透性增加，使得胞內(nèi)大量離子以及具有紫外吸收的大分子物質(zhì)泄漏，細(xì)胞代謝發(fā)生紊亂。
　　3、10-HDA對(duì)枯草芽孢桿菌基因組DNA及蛋白合成的影響
　　以枯草芽孢桿菌為供試菌，采用凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)及原子力顯微鏡觀察10-

4、HDA與菌體 DNA結(jié)合情況，并采用 DNA瓊脂糖凝膠電泳觀察10-HDA作用后菌體DNA含量的變化，以及10-HDA對(duì)菌體基因組PCR的影響。結(jié)果顯示，當(dāng)10-HDA濃度達(dá)到0.62 mg/mL時(shí)，菌體中基因組DNA的合成量明顯減少，而且10-HDA與細(xì)菌基因組DNA緊密結(jié)合。對(duì)基因組DNA的PCR影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明，當(dāng)PCR體系中10-HDA的濃度達(dá)到1.0 mg/mL時(shí)，DNA的合成被完全阻礙。
　　綜上所述，通過實(shí)驗(yàn)，我們