CHB患者外周血Th17細(xì)胞和單核細(xì)胞Tim-3表達(dá).pdf

1、目的：通過了解T細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋自分子( T cell immunoglobulin mucin，Tim)3在慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)患者外周血單核細(xì)胞、Th17細(xì)胞上的表達(dá)及其與肝臟損傷關(guān)系，探討Tim-3表達(dá)在CHB發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 方法：(1)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)38例CHB組和13例對(duì)照組外周血CD4+T細(xì)胞表面Tim-3的表達(dá)，并以細(xì)胞內(nèi)因了染色技術(shù)(intracellula

2、r cytokine staining, ICCS)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)對(duì)其中22例CHB組外周血中Th17細(xì)胞頻數(shù)以及血漿IL-17濃度進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)分析其與ALT、TBil、PTA、HBVDNA、HBeAg等之間的相關(guān)性。(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)上述10例CHB組外周血中Th17細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)，并分析其與ALT、TBil、PT、HBVDNA、HB

3、eAg等之間相關(guān)性。(3)體外培養(yǎng)的PBMCs中加Tim-3單克隆抗體阻斷Tim-3/Tim-3L通路，ELISA檢測(cè)上清IL-17的表達(dá)水平。(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)25例CHB組和13對(duì)照組CD14+CD16-單核細(xì)胞、CD14+CD16+單核細(xì)胞表面Tim-3的表達(dá)，分析紐間差異以及CHB組單核細(xì)胞Tim-3表達(dá)與ALT、TBil、PTA、HBVDNA、HBeAg等之間的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：(1)CHB組表達(dá)Tim-3的CD

4、4+T細(xì)胞頻數(shù)為6.32±4.44％，對(duì)照組表達(dá)Tim-3的CD4T細(xì)胞頻數(shù)為3.20±2.70％，CHB組表達(dá)Tim-3的CD4T細(xì)胞頻數(shù)高于對(duì)照紐，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，t=2.578，P＜0.05。CHB組表達(dá)Tim-3的CD4+T細(xì)胞頻數(shù)與ALT、TBil、PTA、HBVDNA以及HBeAg均無相關(guān)性。CHB組Th17細(xì)胞頻數(shù)為3.40±1.82％，對(duì)照組Th17細(xì)胞頻數(shù)為2.21±0.90％,CHB組Th17細(xì)胞頻數(shù)高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)意義，t=2.663,P＜0.05;CHB組Th17細(xì)胞頻數(shù)與PTA負(fù)相關(guān)，r=-0.488,P＜0.05。CHB組血漿IL-17水平為154.09±79.62pg/ml,對(duì)照組血漿IL-17水平為265.34±99.07，CHB組血漿IL-17水平低于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，t=3.902，P＜0.01。CHB組血漿IL-17含量與HBVDNA載量負(fù)相關(guān)，r=-0.477,P＜0.05;CHB組血漿1L-17含量與TBil水平負(fù)相關(guān)，

6、r=-0.504,P＜0.05。(2)CHB組未發(fā)現(xiàn)有表達(dá)Tim-3的Th17細(xì)胞，部分對(duì)照組Th17細(xì)胞低表達(dá)Tim-3。(3)阻斷Tim-3信號(hào)通路能促進(jìn)CHB組PBMCs表達(dá)IL-17。(4)CHB組表達(dá)Tim-3的CD14+CD16+單核細(xì)胞頻數(shù)為69.50±21.52％，對(duì)照組表達(dá)Tim-3的CD14+CD16'單核細(xì)胞頻數(shù)為38.83±15.52％,CHB組表達(dá)Tim-3的CD14+CD16+單核細(xì)胞頻數(shù)高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、意義，t=3.398，P＜0.01。
　　 結(jié)論：(1)CHB組外周血CD4+T細(xì)胞Tim-3表達(dá)升高。(2)CHB組外周血Th17細(xì)胞頻數(shù)增高，與PTA負(fù)相關(guān)；而外周血漿IL-17含量較對(duì)照組降低，與HBVDNA載黽和TBil水平負(fù)相關(guān)。(3)Tim-3單克降抗體阻斷Tim-3信號(hào)通路能促進(jìn)CHB組PBMCs表達(dá)IL-17。(4)CHB紐CD14+CD16+單核細(xì)胞上調(diào)表達(dá)Tim-3。(5)外周血CD4+T細(xì)胞和單核細(xì)胞高表達(dá)