白斑狗魚嗜水氣單胞菌敗血癥病原的分離鑒定及致病性研究.pdf

1、白斑狗魚是新疆主要的土著經濟魚類之一，屬于兇猛的肉食性亞冷水性魚類，在新疆的人工養(yǎng)殖雖起步晚但已成規(guī)模，由于集約化養(yǎng)殖密度高，餌料魚來源不明等原因，導致病害問題隨即發(fā)生，其中暴發(fā)細菌性敗血癥是危害白斑狗魚養(yǎng)殖的主要病害之一，給當地水產養(yǎng)殖業(yè)造成經濟損失。使用藥物防治細菌性敗血癥是當地發(fā)生該病的主要手段，但是可誘發(fā)病原菌產生耐藥性，導致魚體肝腎等器官功能受損，并造成藥物殘留等食品安全問題。本文通過對新疆白斑狗魚發(fā)生的嗜水氣單胞菌病進行病原

2、菌的分離鑒定，對病變的器官組織做病理組織學方面的分析，以及對分離菌株進行多種抗菌藥物的敏感性研究，為分析疾病發(fā)生過程中致病菌的特點積累基礎性材料，為提高防治效果奠定基礎。
　　本研究從自然條件下疑似患有細菌性敗血癥的白斑狗魚分離到13株菌株，通過形態(tài)學觀察、生理生化特性的鑒定以及分子生物學鑒定菌株的毒力因子，部分菌株進行人工感染試驗證實其具有致病力，結果顯示:PK001-PK009等13個分離菌株的生理生化特性與嗜水氣單胞菌的生理

3、生化特性基本一致，通過分子生物學方法測定16SrRNA以及毒力因子鑒定13個菌株為嗜水氣單胞菌，可知嗜水氣單胞菌是主要的病原菌，能感染魚體引起細菌性敗血癥。其結果如下:
　　將分離到的含有三種毒力基因的分離株PK001、PK006對健康白斑狗魚進行人工感染回歸實驗，發(fā)現其患病癥狀與自然病例相似，死亡率達到80％以上;并從臨死白斑狗魚的腎臟、肝臟等組織重新分離細菌，經鑒定與原病原菌一致。用鯽作為分離菌株的絲氨酸蛋白酶基因(ahpA)

4、、溶血素基因(hlyA)和氣溶素基因(aerA)毒力檢測對象，分別用含有三種、兩種、一種和零種目的毒力基因的菌株PK001、PK002、PK005、PK009感染鯽，死亡率差別較大。人工感染其結果發(fā)現:菌株含有毒力基因的種類影響其致死力，菌株所含毒力基因越少則毒力越弱的規(guī)律。
　　通過對白斑狗魚發(fā)生該病的病理學變化分析得出:感染而發(fā)病的白斑狗魚可見潰瘍、敗血等明顯癥狀，主要特點是體表有明顯病灶，軟化且向外隆起，局部皮膚及肌肉組織發(fā)