IRE1及JNK在慢性阻塞性肺疾病內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用.pdf

1、目的：
　　研究香煙煙霧（CS）誘導(dǎo)肺內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）時(shí)IRE1及JNK激活情況及其與慢性阻塞性肺疾?。–OPD）的關(guān)系。
　　方法：
　　研究分為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)兩部分。
　　1．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分：40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、吸煙2個(gè)月組、吸煙4個(gè)月組和戒煙組（吸煙4個(gè)月然后戒煙1個(gè)月），單純被動(dòng)吸煙法復(fù)制COPD模型。收集各組大鼠肺組織標(biāo)本，免疫組織化學(xué)、Western blot檢測(cè)IRE1α、P-

2、IRE1、JNK、P-JNK蛋白表達(dá)水平。
　　2．臨床實(shí)驗(yàn)部分：通過(guò)肺癌肺葉切除手術(shù)收集非吸煙非 COPD、吸煙非COPD、吸煙 COPD患者肺組織標(biāo)本各10例；Western blot檢測(cè)IRE1α、P-IRE1、JNK、P-JNK蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.動(dòng)物部分
　　1.1肺組織病理學(xué)觀察結(jié)果：與對(duì)照組相比，吸煙2月組大鼠肺結(jié)構(gòu)紊亂,部分肺泡壁變薄，出現(xiàn)斷裂；吸煙4月組大鼠肺結(jié)構(gòu)紊亂更明顯，肺泡

3、破裂，肺泡腔擴(kuò)大，部分融合成肺大泡；戒煙組大鼠肺泡腔擴(kuò)大較吸煙4月組無(wú)顯著改變。
　　1.2大鼠肺功能結(jié)果示吸煙2個(gè)月組大鼠0.3秒用力呼氣容積（FEV0.3）和呼氣峰流速（PEF）較對(duì)照組顯著降低（FEV0.375.48±2.57(％) VS83.47±4.98(%)，PEF33.42±3.21VS40.11±3.66（ml/s） P均<0.05）；吸煙4月組大鼠肺通氣功能較吸煙2月組進(jìn)一步降低（FEV0.366.18±4.12

4、(%) VS75.48±2.57(%)，PEF25.89±2.22（ml/s）VS33.42±3.21（ml/s），P均<0.05）；戒煙組與吸煙4月組大鼠肺通氣功能無(wú)顯著性差異（P值均>0.05）。
　　1.3免疫組化結(jié)果顯示IRE1α主要表達(dá)于肺結(jié)構(gòu)細(xì)胞的胞漿，在對(duì)照組和吸煙組沒(méi)有顯著差別；P-IRE1主要定位于肺泡上皮細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞，支氣管上皮細(xì)胞的胞漿，在對(duì)照組大鼠表達(dá)最低，吸煙2月組表達(dá)較對(duì)照組顯著升高（P<0.05

5、），吸煙4月組表達(dá)較吸煙2月組進(jìn)一步升高（P<0.05），而戒煙組較吸煙4月組相比較則沒(méi)有顯著差別（P>0.05）；JNK主要定位于肺泡上皮細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞，支氣管上皮細(xì)胞的胞漿中，胞核也有少量表達(dá)，各組大鼠 JNK蛋白表達(dá)無(wú)顯著性差異；P-JNK主要定位于肺泡上皮細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞，支氣管上皮細(xì)胞的細(xì)胞核，細(xì)胞漿也有少量分布，在對(duì)照組大鼠表達(dá)最低，吸煙2月組表達(dá)較對(duì)照組顯著升高（P<0.05），吸煙4月組表達(dá)較吸煙2月組明顯升高（P

6、<0.05），而戒煙組表達(dá)較吸煙4月組相比無(wú)顯著差別（P>0.05）；Western blot結(jié)果和免疫組化一致。
　　1.4相關(guān)分析結(jié)果示 P-IRE1表達(dá)、P-JNK蛋白表達(dá)與肺功能呈負(fù)相關(guān)，與細(xì)胞凋亡率正相關(guān)， P-IRE1蛋白表達(dá)與P-JNK蛋白表達(dá)呈正相關(guān)。
　　2.臨床部分
　　2.1肺組織形態(tài)學(xué)觀察：與對(duì)照組比，COPD組上皮層及平滑肌層增厚,肺泡結(jié)構(gòu)紊亂,上皮細(xì)胞脫落，管壁大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡管、肺泡

7、囊及肺泡腔擴(kuò)大,肺泡壁斷裂,可見部分肺泡融合成肺大泡。非 COPD吸煙者肺組織結(jié)構(gòu)與對(duì)照組無(wú)明顯差異。
　　2.2 Western blot結(jié)果顯示IRE1α各組表達(dá)沒(méi)有區(qū)別；P-IRE1在對(duì)照組表達(dá)最低，吸煙非 COPD組表達(dá)較對(duì)照組顯著升高（P<0.05），吸煙 COPD組表達(dá)較吸煙非 COPD組人群進(jìn)一步升高（P<0.05）；JNK各組表達(dá)沒(méi)有顯著性差異。P-JNK吸煙非 COPD組P-JNK較對(duì)照組明顯升高（P<0.05）