姜黃素脂質(zhì)體和脂質(zhì)體凝膠的制備及其經(jīng)皮給藥研究.pdf

1、姜黃素(Curcumin)是從姜黃根莖中提取得到的一種黃色色素，作為天然的植物提取物，其來源廣、毒性低，具有抗炎、抗腫瘤、抗菌抗病毒等藥理活性。但姜黃素體外穩(wěn)定性差，口服易被胃腸道和肝臟代謝而使其生物利用度極低，從而影響其藥效的發(fā)揮。經(jīng)皮給藥途徑與其他給藥途徑相比具有如可以避免肝臟首過效應和胃腸道對藥物的降解、方便給藥等優(yōu)點，因此考慮將姜黃素制備成經(jīng)皮給藥制劑，用于皮膚炎癥、皮膚腫瘤和癌癥皮膚轉(zhuǎn)移等皮膚疾病的治療。但由于姜黃素本身脂溶性

2、強的特點和受到角質(zhì)層屏障的限制，姜黃素透皮制劑的研究也將是一大挑戰(zhàn)。脂質(zhì)體作為一種常用的經(jīng)皮給藥載體，可以促進藥物的皮膚滲透性和皮內(nèi)滯留量。因此，本文將以脂質(zhì)體為姜黃素透皮給藥載體，并將其制備成凝膠劑，進行經(jīng)皮給藥研究，利用其良好的生物相容性，促進姜黃素的皮膚滲透和皮內(nèi)滯留，這對于姜黃素在皮膚局部或深層組織發(fā)揮藥效具有一定的實際意義。本文的主要研究內(nèi)容如下：
　　一、處方前研究。建立了姜黃素的分析方法，通過方法學考察表明所建立的分

3、析方法準確、可靠；考察了姜黃素在不同溶媒體系中的溶解度，確定了姜黃素體外釋放和透皮實驗的接收介質(zhì)為20％乙醇和0.5％吐溫80的混合溶液；運用軟件預測了姜黃素的油水分配系數(shù)，并根據(jù)其分子量和油水分配系數(shù)，從理論上預測了其體外經(jīng)皮滲透性能，結果表明姜黃素本身的經(jīng)皮滲透性較差，需要通過相應的劑型進行改善；考察了姜黃素在不同溫度和pH條件下的穩(wěn)定性，結果表明24 h內(nèi)，姜黃素在50℃和60℃條件下能穩(wěn)定存在；在pH為5.0、6.5、7.0條件

4、下顯示出較好的穩(wěn)定性，而在pH為7.8－8.0的條件下有明顯降解的趨勢。
　　二、姜黃素脂質(zhì)體的制備和評價。選擇了微柱離心法為姜黃素脂質(zhì)體包封率的測定方法，并以包封率為指標，篩選了姜黃素的制備工藝；以包封率和載藥量為指標，通過單因素和正交試驗進行了處方優(yōu)化，得到優(yōu)化工藝為氯仿為有機溶劑，水合溫度60℃，水合時間30 min，超聲功率80 W，超聲時間180 s，最佳處方為姜黃素用量10 mg，磷脂用量200 mg，膽固醇用量20

5、mg，吐溫80用量20 mg，5 mL pH6.5的磷酸鹽緩沖液為水合介質(zhì)；以此工藝和處方比例分別制備了姜黃素大豆磷脂脂質(zhì)體、姜黃素蛋黃磷脂脂質(zhì)體和姜黃素氫化大豆磷脂脂質(zhì)體，采用透射電鏡，馬爾文粒徑測定儀和差示掃描量熱儀(DSC)等對其物理性質(zhì)進行了表征，結果表明姜黃素大豆磷脂、蛋黃磷脂和氫化磷脂脂質(zhì)體形態(tài)相似，均為類圓形，粒徑分別為102.4±2.2、109.1±4.9和117.4±4.6 nm，多分散性指數(shù)分別為0.247±0.02

6、8、0.261±0.013和0.279±0.039，電位分別為-12.9±1.4、-11.9±2.0和-10.4±2.7 mv，包封率分別為(82.32±3.91)％、(81.59±2.38)％和(80.77±4.12)％；DSC的結果說明三種脂質(zhì)體中脂質(zhì)膜均與姜黃素發(fā)生了相互作用，存在形式均發(fā)生了變化；脂質(zhì)體的釋放結果表明，姜黃素氫化磷脂脂質(zhì)體的釋放較慢，其釋放速度僅為姜黃素大豆磷脂和蛋黃磷脂脂質(zhì)體釋放速度的1/2，推測與脂質(zhì)膜的流動

7、性有關；穩(wěn)定性實驗結果表明，4℃條件下，三種脂質(zhì)體在90天內(nèi)未出現(xiàn)聚集和明顯的藥物滲漏現(xiàn)象。
　　三、姜黃素脂質(zhì)體的體外透皮研究和抗腫瘤活性評價。采用Franz擴散池，以單位面積皮膚累計滲透量和滯留量為指標考察了姜黃素脂質(zhì)體離體經(jīng)皮擴散的影響因素。結果表明，姜黃素脂質(zhì)體的皮膚累計滲透量和滯留量均顯著高于姜黃素溶液(累計滲透量：12.56μg·cm-2，滯留量：1.49μg·cm-2)，說明脂質(zhì)體作為姜黃素的透皮載體，能增強其經(jīng)皮滲

8、透性能。此外，隨著脂質(zhì)體粒徑減小(400－100 nm)，姜黃素皮膚累計滲透量和滯留量隨之增大(累計滲透量：23.26－34.65μg·cm-2，滯留量：3.11-5.49μg·cm-2)；隨著藥物濃度的增大(1.0-2.0μg·mL-1)，姜黃素的皮膚累計滲透量和滯留量也隨之增大(累計滲透量：21.53－34.05μg·cm-2，滯留量：4.02-5.37μg·cm-2)；與姜黃素氫化磷脂脂質(zhì)體(累計滲透量：21.87μg·cm-2，

9、滯留量：3.32μg·cm-2)相比，大豆磷脂脂質(zhì)體(累計滲透量：34.84μg·cm-2，滯留量：5.66μg·cm-2)和蛋黃磷脂脂質(zhì)體(累計滲透量：31.97μg·cm-2，滯留量：5.23μg·cm-2)更利于增強藥物的透皮性能。以B16BL6黑色素瘤細胞為研究對象，考察了姜黃素脂質(zhì)體抗腫瘤活性，實驗結果表明，姜黃素脂質(zhì)體的體外抗腫瘤活性優(yōu)于姜黃素溶液(IC50值為22.42μg·mL-1)；且不同磷脂組成的姜黃素脂質(zhì)體的抗腫瘤

10、作用有差異，與氫化磷脂脂質(zhì)體相比(IC50值為14.04μg·mL-1)，大豆磷脂脂質(zhì)體(IC50值為10.02μg·mL-1)和蛋黃磷脂脂質(zhì)體(IC50值為11.35μg·mL-1)顯示出了更好的體外抗腫瘤活性。
　　四、姜黃素脂質(zhì)體凝膠的制備和體外透皮研究。在以上研究工作的基礎之上，選擇姜黃素大豆磷脂脂質(zhì)體制備成凝膠劑。以姜黃素的皮膚累計滲透量和滯留量為指標，從卡波姆、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉中篩選得卡波姆為姜黃素脂質(zhì)體的凝

11、膠基質(zhì)，并進一步篩選了基質(zhì)濃度及化學促滲劑，最終選擇1％卡波姆為凝膠基質(zhì)聯(lián)合2％氮酮和2％薄荷醇為促滲劑制備姜黃素脂質(zhì)體凝膠(含姜黃素1 mg·g-1)。透皮實驗結果表明，姜黃素脂質(zhì)體凝膠劑的皮膚累計滲透量(87.38μg·cm-2)和皮膚滯留量(13.44μg·cm-2)水平均優(yōu)于普通凝膠制劑(累計滲透量：32.07μg·cm-2，滯留量：4.16μg·cm-2)。脂質(zhì)體凝膠的初步穩(wěn)定性考察結果表明，在3個月內(nèi)其穩(wěn)定性良好。
　

12、　五、姜黃素脂質(zhì)體凝膠的體內(nèi)藥效學評價。采用B16BL6小鼠黑色素瘤模型，以腫瘤抑制率為指標，考察了姜黃素脂質(zhì)體凝膠劑的體內(nèi)抗腫瘤活性。實驗結果表明，姜黃素脂質(zhì)體凝膠劑對小鼠黑色素瘤生長有明顯抑制作用，抑瘤率為(43.6±3.6)％，與姜黃素普通凝膠劑相比升高了1.74倍。
　　本研究通過透皮給藥途徑避免了肝臟首過效應和胃腸道代謝對姜黃素的影響，采用脂質(zhì)體凝膠劑顯著提高了姜黃素的皮膚滲透量和滯留量，有利于姜黃素以經(jīng)皮給藥方式治療皮