大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞相關(guān)分子機(jī)制研究.pdf

1、第一部分還原型谷胱甘肽誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞分化過程中NSE、GFAP相關(guān)mRNA及蛋白表達(dá)變化研究 目的：初步探討還原型谷胱甘肽(GSH)對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow stromalcells，BMSCs)的誘導(dǎo)分化機(jī)制。 方法：體外培養(yǎng)和純化大鼠BMSCs，用GSH對(duì)其進(jìn)行誘導(dǎo)，分別于誘導(dǎo)后6h、12h、24h后對(duì)其進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR和Westblot檢測(cè)，測(cè)定各組中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron

2、 specific enolase，NSE)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP) mRNA及蛋白水平的表達(dá)情況。 結(jié)果：誘導(dǎo)6h、12h、24h后BMSCs分化形成神經(jīng)元樣細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞，實(shí)時(shí)定量PCR和Westblot檢測(cè)結(jié)果表明BMSCs中NSE及GFAP的mRNA與蛋白水平表達(dá)明顯高于對(duì)照組，以12h最為明顯。 結(jié)論：GSH可以誘導(dǎo)BMSCs分化形成神

3、經(jīng)元樣細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞樣細(xì)胞，且誘導(dǎo)后NSE及GFAP的mRNA與蛋白水平表達(dá)增高。 第二部分堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子與表皮生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化相關(guān)基因表達(dá)譜研究 目的：初步探討大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化前后基因表達(dá)譜的變化，尤其是與神經(jīng)元發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)情況。 方法：體外培養(yǎng)和純化大鼠BMSCs，用堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblastgrow

4、th factor，bFGF)和表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor, EGF)對(duì)其進(jìn)行誘導(dǎo)，分別于誘導(dǎo)前和誘導(dǎo)后第七天用Affymetrix大鼠表達(dá)譜芯片檢測(cè)，并且利用生物信息學(xué)分析技術(shù)比較誘導(dǎo)前后基因表達(dá)譜的改變。 結(jié)果：共有差異基因216條，其中上調(diào)基因125條，下調(diào)基因91條。與神經(jīng)元發(fā)育密切相關(guān)的基因有13條，其中上調(diào)7條，下調(diào)6條。 結(jié)論：經(jīng)體外誘導(dǎo)的BMSCs具有向神經(jīng)元分化的潛能并