蘿卜及其近緣屬種親緣關(guān)系分析與遺傳圖譜構(gòu)建.pdf

1、蘿卜(Raphanus sativus L)是起源于中國的一種重要的蔬菜作物，種質(zhì)資源十分豐富。合理進行親本選配進行品種遺傳改良是當前育種工作的重點。不同種屬間親緣關(guān)系的評價和遺傳圖譜的構(gòu)建研究對提高蘿卜育種效率和推動蘿卜育種工作的發(fā)展具有重要意義。本研究首次利用RAMP標記對蘿卜遺傳多樣性進行研究，分析和探討蘿卜及蕓薹屬材料間親緣關(guān)系。應(yīng)用RAPD標記技術(shù)對蘿卜親本、F<,1>及其F<,2>分離群體進行遺傳分析；并以蘿卜亞種間的F<,

2、2>代群體為作圖群體，利用RAPD、ISSR、RAMP標記初步構(gòu)建出國內(nèi)第一張?zhí)}卜遺傳圖譜。為蘿卜的分子育種和QTL定位奠定了基礎(chǔ)。 采用RAMP標記分析了十字花科17個蘿卜品種及與11個蕓薹屬材料的遺傳多樣性與親緣關(guān)系。35組引物組合共產(chǎn)生626條RAMP條帶，多態(tài)性高達98.7％，平均每組引物可產(chǎn)生17.7條多態(tài)性條帶。利用NTSYS-pc軟件進行聚類分析和主坐標分析，兩者結(jié)果一致。研究結(jié)果還表明，蘿卜屬與蕓薹屬可獨立聚類，

3、但它們之間的遺傳相似水平較高；蘿卜種內(nèi)的RAMP多態(tài)性較豐富，有5個引物組合可以單獨將17份蘿1、材料各自分開，可以根據(jù)地理起源與根皮色基本劃分蘿卜品種；蕓薹屬內(nèi)，聚類分析中，B染色體組與A、C染色體組物種相互分開，說明不同種之間的遺傳關(guān)系與它們的染色體組有很大的相關(guān)性，B染色體組與A、C染色體組物種的遺傳關(guān)系較遠；此外，蘿卜變種“藍花子”、“美泰黑森”與蕓薹屬的親緣關(guān)系相對于普通栽培種要近。研究結(jié)果也支持了蘿卜來源于rapa/oler

4、acea進化途徑和nigra進化途徑的雜種的假說。研究表明RAMP分子標記是評價十字花科種屬間遺傳多樣性與親緣關(guān)系的一種有效方法。 從463條隨機引物中篩選出75條引物用于親本及F<,1>的RAPD標記的遺傳動態(tài)分析，多態(tài)性條帶的變化范圍為26.1％～31％，平均每個引物可產(chǎn)生1.95～2.37條，多態(tài)性水平較低。正反交F<,1>的擴增位點也有差異，其中大部分都呈現(xiàn)出母性擴增的規(guī)律，有31.1％差異位點表現(xiàn)出父性擴增的規(guī)律，可能

5、是該位點在偏向于在表達障礙較小的雜交中表達。用24條隨機引物對28株F<,2>單株進行分析，獲得34個RAPD標記，其中有4個在F<,2>代未發(fā)生分離?？ǚ綔y驗表明，25個標記正常分離，占總數(shù)的73.5％，表明RAPD標記在蘿卜F<,2>分離群體主要是呈正常孟德爾遺傳。說明RAPD標記能用于本群體的遺傳作圖。 以Nau-WH-04(Raphanus sativus L.)×藍花子(R..sativus L.var raphani

6、stroid)得到的180株F<,2>代單株為作圖群體，利用形態(tài)學標記和RAPD、ISSR、RAMP分子標記構(gòu)建蘿卜亞種間的遺傳圖譜。172個標記用于連鎖分析，得到一張包含78個標記，13個連鎖群的遺傳圖譜框架，包括55個RAPD標記、6個ISSR標記、14個RAMP標記和3個形態(tài)標記，其中來自父本“藍花子”的標記46個，31個標記來自母本“Nau-WH-04”。用于連鎖分析的172個標記中除6個未發(fā)生分離外，還有94個標記保持獨立而未