貴州苗藥頭花蓼有效組分的體內(nèi)外代謝研究.pdf

1、目的：研究貴州苗藥頭花蓼有效組分在大鼠及模式生物斑馬魚中的體內(nèi)代謝、大鼠及人腸道菌群中的體外代謝，闡明其在大鼠及斑馬魚中的代謝規(guī)律及其在腸道中的代謝特征，明確其吸收進入體內(nèi)的成分及其代謝產(chǎn)物，探討其體內(nèi)直接作用物質(zhì)。
　　方法:（1）通過高分辨質(zhì)譜檢測到頭花蓼有效組分中5個代表性成分（槲皮素、槲皮苷、金絲桃苷、沒食子酸及原兒茶酸）；（2）給健康SD大鼠口服頭花蓼有效組分后,收集其血清、尿液、糞便、膽汁作為供試品；（3）選取頭花蓼有

2、效組分中含量較高的5個代表性成分，將斑馬魚分別置于含5個成分的0.4％DMSO溶液中，放置24h，分別取含5個成分的DMSO溶液及斑馬魚作為供試品；（4）在大鼠及人腸道菌液中分別加入5個成分，在厭氧條件下孵育得到供試品。上述供試品分別采用超高壓液相色譜-電噴霧-四級桿-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜儀進行檢測，運用Metabolite Predict、Metabolite Detect對樣品中的代謝產(chǎn)物進行預測并檢測分析，結(jié)合Mass Defect

3、Filter技術進一步有效提取代謝產(chǎn)物信息，排除基質(zhì)背景干擾，并應用Data Analysis中Smart Formula功能推測代謝產(chǎn)物化學式。
　　結(jié)果：在大鼠體內(nèi)共檢出41個代謝產(chǎn)物峰，其中血清、尿液、糞便、膽汁分別有17、18、12、19個（含交叉成分），主要以槲皮素葡萄糖醛酸化、甲基葡萄糖醛酸化、硫酸化代謝產(chǎn)物為主；在斑馬魚體內(nèi)外檢出25個代謝產(chǎn)物峰，其中斑馬魚、體外藥液分別為25、9個，并檢測到上述5個原型成分，表明頭

4、花蓼有效組分均能吸收進入體內(nèi),代謝產(chǎn)物以甲基硫酸化、葡萄糖醛酸化為主，說明頭花蓼有效組分在大鼠、斑馬魚體內(nèi)代謝基本一致；在大鼠及人腸道菌液中共檢出16、23個代謝物峰，槲皮苷和金絲桃苷主要以脫糖反應為主，脫糖生成的苷元槲皮素可進一步發(fā)生羥基化、還原等Ⅰ相反應和甲基化等Ⅱ相反應，沒食子酸和原兒茶酸能在腸道酶系的作用下發(fā)生脫羧、甲基化反應。
　　結(jié)論：本課題建立了頭花蓼有效組分及其代謝產(chǎn)物的高分辨質(zhì)譜分析方法，闡明了頭花蓼有效組分的體