異種移植臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療心肌梗死.pdf

1、目的：探討無呼吸機(jī)輔助下正中開胸表面結(jié)扎兔冠狀動脈左室支建立心梗模型成功率及二次開胸可行性；觀察間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)心臟表面注射移植治療兔心肌梗死(MI)的效果。
　　方法：
　　1、建立兔心肌梗死模型：15只成年日本大耳白兔，均在無呼吸機(jī)輔助下正中開胸表面結(jié)扎冠狀動脈左室支建立心肌梗死模型，以術(shù)中肉眼觀變化、建模前后心電圖結(jié)合心臟彩超左室縮短分?jǐn)?shù)(LVFS)減少值>5％作為建模成功標(biāo)準(zhǔn)，輔以組織病理學(xué)檢測，觀察建模效果

2、；建模后4周末行二次開胸，根據(jù)其存活情況判斷是否可行。而后，應(yīng)用該方法制作20只兔模型備用。
　　2、將20只兔隨機(jī)均分為兩組：移植組和對照組。酶消化法分離人臍帶MSCs，擴(kuò)增培養(yǎng)后調(diào)節(jié)濃度為5×106/0.4mL懸液。于兔建模后4周二次開胸時(shí)，移植組心臟表面4點(diǎn)注射MSCs懸液共0.4mL，對照組心臟表面4點(diǎn)注射溫生理鹽水共0.4mL。細(xì)胞移植后4周觀察心臟彩超LVFS和血流動力學(xué)指標(biāo)，以及病理學(xué)改變。
　　結(jié)果：

3、　　1、結(jié)扎兔冠狀動脈左室支建立MI模型，共成功12只，二次開胸后共存活8只，存活率67％(8/12)。與建模前相比，建模后兔心電圖出現(xiàn)典型動態(tài)變化，LVEDD和LVESD增大，LVFS明顯降低(P<0.05)。二次開胸后心室內(nèi)徑變化與建模前、建模后均無明顯差別(P>0.05)，但LVFS與建模前差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；組織病理學(xué)HE染色和Masson三色染色顯示，與正常部位心肌組織相比，梗死區(qū)及周邊組織心肌纖維排列紊亂、斷

4、裂或肥大，部分心肌細(xì)胞丟失、呈空泡變性，間質(zhì)水腫，可見少量炎性細(xì)胞浸潤。
　　2、分離培養(yǎng)的臍帶MSCs顯示呈梭形貼壁生長，高表達(dá)CD105和CD90，大多數(shù)不表達(dá)CD34和CD45。細(xì)胞移植療效：與對照組相比，移植組LVFS明顯升高(P<0.05)，LVSP、LVEDP和-dp/dt max均有明顯變化(P<0.05)。組織病理學(xué)HE染色和Masson三色染色顯示移植組梗死區(qū)與正常區(qū)交界處存活細(xì)胞增多，且梗死區(qū)外側(cè)可見大量紅細(xì)胞