兩個常染色體隱性視網(wǎng)膜色素變性合并白內(nèi)障家系的致病基因突變分析.pdf

1、視網(wǎng)膜色素變性（Retinitis Pigmentosa，RP）是一種常見的遺傳性視網(wǎng)膜功能退行性疾病，全球發(fā)病率為1:3000-5000。RP典型臨床癥狀為夜盲、進(jìn)行性視野缺損和視力下降，可伴發(fā)斜視、屈光不正、眼球震顫和白內(nèi)障等，其中白內(nèi)障發(fā)生率高于40％。本研究收集了兩個常染色體隱性視網(wǎng)膜色素變性合并白內(nèi)障家系，通過連鎖分析、候選基因測序及外顯子組測序等方法鑒定了這兩個家系的致病基因及突變，并對其分子致病機(jī)理進(jìn)行了初步探討，結(jié)果如下

2、：
　　家系1三位患者分別來自兩個換親家庭，眼底檢查發(fā)現(xiàn)其視網(wǎng)膜有骨針樣色素沉積、血管變細(xì)、視盤蒼白和不同程度的黃斑萎縮，且雙眼并發(fā)后囊下白內(nèi)障，呈放射狀。以微衛(wèi)星標(biāo)記對家系1已知常染色體隱性RP致病基因進(jìn)行了連鎖分析，將其致病基因定位于14號染色體微衛(wèi)星標(biāo)記D14S163和D14S1050之間。該區(qū)間內(nèi)有兩個已知常染色體隱性RP致病基因RDH12和SPATA7，對先證者基因組DNA直接測序發(fā)現(xiàn)RDH12復(fù)合雜合突變（c.184C

3、>T/p.R62X和c.437T>A/p.V146D）和SPATA7雜合改變c.995T>C/p.I332T。RFLP分析證實RDH12復(fù)合雜合突變在家系內(nèi)與疾病共分離，而且在家系外100個正常人中未檢測到這兩個突變。保守性分析發(fā)現(xiàn)RDH12第62位精氨酸和146位纈氨酸從斑馬魚到人類高度保守。RDH12 c.184C>T和c.437T>A為已報道突變，說明這兩個突變對疾病均有貢獻(xiàn)。因此推測RDH12基因復(fù)合雜合突變c.184C>T/p

4、.R62X，c.437T>A/p.V146D可能為家系1患者致病的遺傳基礎(chǔ)。該家系三位患者均攜帶SPATA7雜合改變c.995T>C/p.I332T，它是否會影響患者的臨床表型有待于進(jìn)一步分析。全球有11.8%的RP患者攜帶RDH12突變，其中白內(nèi)障并發(fā)率大于40%，但該基因突變在中國RP人群中較為罕見。結(jié)合本研究結(jié)果，目前僅在6個漢族RP家系和8例漢族散發(fā)患者中發(fā)現(xiàn)RDH12突變，占中國RP患者的4.6%，其中并發(fā)白內(nèi)障為30%。進(jìn)一

5、步統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)在20例漢族RDH12突變患者中，12例均攜帶c.437T>A突變，說明該位點在漢族RP患者中是一個突變熱點。
　　家系2三位患者來自一近親結(jié)婚家庭，眼底檢查可見視網(wǎng)膜骨針樣和團(tuán)塊狀色素沉積，脈絡(luò)膜嚴(yán)重萎縮，雙眼合并粉塵狀后囊下白內(nèi)障，其中先證者和一位患者眼底視網(wǎng)膜不見結(jié)晶樣沉積，另一患者視網(wǎng)膜則可見少量結(jié)晶樣沉積。外顯子組測序發(fā)現(xiàn)先證者和一位患者均攜帶CYP4V2基因的純合突變c.1198C>T，進(jìn)一步測序發(fā)現(xiàn)該純合突

6、變與家系2疾病共分離。CYP4V2 c.1198C>T突變導(dǎo)致CYP42V蛋白第400位高度保守的精氨酸變?yōu)榘腚装彼幔╬.R400C）。CYP4V2 c.1198C>T/p.R400C為已報道突變，說明該突變在疾病發(fā)生中起作用。這些結(jié)果說明CYP4V2純合突變c.1198C>T/p.R400C可能是家系2患者的致病原因。本研究進(jìn)一步證實該基因突變引起的疾病表型具有異質(zhì)性，同時也為研究BCD患者CYP4V2基因的突變類型和突變頻率提供了數(shù)