喉咽癌晚期喉癌不同治療方案的臨床分析及喉咽鱗癌患者血清比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、第一部分.喉咽癌、晚期喉癌不同治療方案臨床分析 背景與目的:喉咽癌、晚期喉癌是頭頸科常見的兩種惡性腫瘤，Ⅰ～Ⅱ期喉鱗癌經(jīng)手術(shù)或放療后一般有較好的療效，但喉咽癌、Ⅲ～Ⅳ期喉鱗癌的療效和預(yù)后尚不能令人滿意，治療方法也頗多爭(zhēng)議，本研究著重探討兩種鱗癌不同治療方法的療效，比較各組生存率、喉功能保留率、未控復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移情況，探索更合理的處理方法。 材料與方法:回顧性分析1991～2000年間中山大學(xué)腫瘤防治中心初治的97例喉咽鱗癌和

2、202例Ⅲ～Ⅳ期喉鱗癌病例，按治療模式分組，采用SPSS10.0軟件Kaplan-Meier法計(jì)算喉咽鱗癌各組患者生存率，組間生存曲線比較采用Logrank檢驗(yàn)和Breslow檢驗(yàn)，采用SPSS10.0軟件壽命表法計(jì)算喉鱗癌各組患者生存率，組間生存曲線比較采用Wilcoxon(Gehan)法，各組未控復(fù)發(fā)情況比較采用Pearsonχ2或Fisher's確切概率法檢驗(yàn)，觀察比較各組的治療效果。 結(jié)果:97例喉咽鱗癌的總的3年累計(jì)生

3、存率46.43％，5年累計(jì)生存率31.88％，中位生存時(shí)間是28個(gè)月。單純放療組、新輔助化療+放療組、單純手術(shù)組、手術(shù)+術(shù)后放療組5年生存率分別是18.33％、23.53％、36.36％和53.65％，5年復(fù)發(fā)率分別是70.00％、52.94％、36.36％和27.27％。接受原發(fā)灶手術(shù)共41例，喉功能部分或全部保留的手術(shù)患者與全喉切除術(shù)不保留喉功能的患者的5年生存率分別是57.14％、39.16％，P=0.3574，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；

4、兩組的5年局部復(fù)發(fā)率分別是21.05％、13.64％，P=0.414，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 Ⅲ～Ⅳ期喉鱗癌的5年累計(jì)生存率42.125％，10年累計(jì)生存率33.20％，中位生存時(shí)間48.5個(gè)月；其中聲門型喉鱗癌的5年累計(jì)生存率61.07％，聲門上型喉鱗癌的5年累計(jì)生存率26.07％；喉鱗癌單純手術(shù)組、手術(shù)+放療組、放療組和化療組的5年生存率分別是53.41％、51.04％、18.33％和7.14％；對(duì)比喉鱗癌單純手術(shù)組和手術(shù)+放療

5、組的5年累計(jì)生存率，無論是Ⅲ期還是Ⅳ期，差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；接受原發(fā)灶手術(shù)治療167例喉鱗癌中，喉部分切除術(shù)31例，5年生存率56.15％，無復(fù)發(fā)；喉全切除術(shù)116例，5年生存率52.08％，復(fù)發(fā)11例。 結(jié)論:喉咽鱗癌以梨狀窩癌最為多見，大多數(shù)確診時(shí)已是晚期，預(yù)后較差。喉咽鱗癌患者接受單純放療或新輔助化療+放療生存率較低，單純手術(shù)治療也不能明顯提高生存率，手術(shù)+放療的治療模式可使患者生存率有明顯提高，部分喉咽鱗

6、癌腫瘤局限，可考慮行保留部分甚至全部喉功能的手術(shù)方式，并不增加復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。Ⅲ～Ⅳ期喉鱗癌治療以手術(shù)為主，全喉切除術(shù)仍是Ⅲ～Ⅳ期喉鱗癌治療的主要手段，選擇部分喉鱗癌病例可行部分喉切除術(shù)，不會(huì)增加原發(fā)灶復(fù)發(fā)的幾率，也不會(huì)降低5年生存率。如術(shù)后可疑腫瘤殘留或切緣陽性等則有術(shù)后放療的必要，而其他病例術(shù)后一般不必放療。 第二部分.喉咽鱗癌患者血清比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究 背景與目的:喉咽癌是頭頸惡性腫瘤中惡性程度較高的一種，相關(guān)癥狀隱匿

7、，不易引起患者甚至非?？漆t(yī)生的注意，腫瘤發(fā)展較快，確診時(shí)多已晚期，常侵犯喉、食管等鄰近重要器官結(jié)構(gòu)。早期診斷對(duì)喉咽鱗癌患者的預(yù)后非常重要，鱗癌分化程度、原發(fā)灶的部位范圍及淋巴結(jié)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與否等也是決定預(yù)后的重要因素。盡管近年來無論是外科技術(shù)還是放療、化療等非手術(shù)措施均取得較大進(jìn)展，但喉咽癌的治療效果仍不理想，復(fù)發(fā)率高、生存率低、預(yù)后差。目前，喉咽鱗癌患者尤其晚期患者的治療多主張需要包括手術(shù)、化療和放療等在內(nèi)的綜合治療。但目前尚無一種滿意

8、的篩查和早期診斷方法，具體治療模式也頗多爭(zhēng)議，因此探索和建立一種簡(jiǎn)單、快速、敏感性高和特異性強(qiáng)的早期診斷技術(shù)已成為臨床醫(yī)學(xué)上的迫切需要，尋找放療化療等療效預(yù)測(cè)的敏感指標(biāo)，進(jìn)而制訂個(gè)體化治療方案也是目前腫瘤領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。本實(shí)驗(yàn)的研究目的是利用表面增強(qiáng)激光解吸電離-飛行時(shí)間-質(zhì)譜(surface-enhancedlaserdesorption/inionation-timeofflight-massspectra，SELDI-TOFM

9、S)技術(shù)從蛋白質(zhì)組學(xué)的角度探討喉咽鱗癌的血清蛋白質(zhì)組指紋圖譜，篩選喉咽鱗癌的潛在的標(biāo)志蛋白，初步建立喉咽鱗癌血清蛋白指紋圖譜決策分類樹診斷模型。通過頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、病理分化程度等的對(duì)比探索潛在的預(yù)測(cè)預(yù)后的血清蛋白標(biāo)記物指標(biāo)。通過喉咽鱗癌患者對(duì)放療、化療敏感性不同的比較，尋找可能預(yù)測(cè)喉咽鱗癌患者放療、化療敏感性的血清蛋白標(biāo)記物，初步建立預(yù)測(cè)喉咽鱗癌放療化療敏感性決策分類樹分析模型圖。 材料與方法:以58例中山大學(xué)腫瘤防治中心20

10、02.6-2005.6住院初次治療的喉咽鱗癌患者和41例年齡與性別匹配的同期正常對(duì)照者作為研究對(duì)象，喉咽鱗癌均為原發(fā)癌，檢查前未行手術(shù)或放化療，其中男57例，女2例，年齡34～82歲，中位年齡59歲，正常對(duì)照41例均為男性，年齡40～83歲，中位年齡62歲。采用美國(guó)CiphergenBiosystems公司CM10芯片(陽離子芯片)，和PBSⅡ-C型蛋白質(zhì)芯片閱讀機(jī)對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象的血清進(jìn)行檢測(cè)并讀取數(shù)據(jù)，獲得的喉咽鱗癌和正常對(duì)照者的血清蛋白

11、指紋譜圖結(jié)果采用BiomarkerWizard軟件比較分析，將數(shù)據(jù)導(dǎo)入BiomarkerPattern軟件初步建立能將兩組正確劃分的分類樹診斷模型。應(yīng)用BiomarkerWizard軟件對(duì)喉咽鱗癌的病理分化程度、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、化療敏感性、放療敏感性不同情況的血清蛋白質(zhì)指紋圖譜進(jìn)行比較，尋找潛在的相關(guān)差異蛋白，初步建立預(yù)測(cè)喉咽鱗癌放療敏感性決策分類樹模型。 結(jié)果: 1、喉咽鱗癌組與正常對(duì)照組相比，在質(zhì)荷比1000-70

12、,000范圍內(nèi)有9個(gè)蛋白質(zhì)峰的相對(duì)含量差異有顯著性意義(P＜0.05)。喉咽鱗癌患者血清中有3個(gè)蛋白標(biāo)志分子表達(dá)上調(diào)，m/z分別為：9194.06，11681.15和51370.19；6個(gè)蛋白標(biāo)志分子表達(dá)下調(diào)，m/z分別為：8815.96，13767.56，13884.95，14057.50，15879.20和17377.60。 2、BiomarkerPattern軟件選取7個(gè)差異性蛋白質(zhì)(m/z分別為：9194.06，1587

13、9.1，51370.1，6624.57，8929.80，1013.77和11681.1)建立喉咽鱗癌的決策分類樹診斷模型。該模型可將用于建立分類樹模型的89.66％(52/58)的喉咽鱗癌患者和92.70％(38/41)的正常對(duì)照正確劃分，總的診斷符合率為90.10％(90/99)，Kappa值為0.9091。 3、將58例喉咽鱗癌患者血清蛋白質(zhì)指紋圖譜按不同臨床病理特征分析比較，結(jié)果表明，喉咽鱗癌分化較差組和分化較好組有1個(gè)血

14、清差異蛋白的表達(dá)強(qiáng)度差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，差異性表達(dá)蛋白在喉咽鱗癌分化較差組高表達(dá)(P=0.0320)，m/z為5341.86，但從現(xiàn)實(shí)的峰的情況看，區(qū)分度并不理想；喉咽鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清各差異蛋白峰的表達(dá)強(qiáng)度差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；喉咽鱗癌化療敏感組和化療不敏感組各血清差異蛋白峰的表達(dá)強(qiáng)度差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；喉咽鱗癌放療敏感組和放療不敏感組血清蛋白質(zhì)指紋圖譜比較，P≤0.05

15、時(shí)有5個(gè)差異性表達(dá)蛋白峰，m/z分別為6115.75，3884.22，5341.79，5952.75和1367.94，均在放療敏感組高表達(dá)。 4、BiomarkerPattern軟件選取2個(gè)差異性蛋白峰(m/z分別為：6115.74和39395.0)建立喉咽鱗癌放療敏感性分類樹預(yù)測(cè)模型，在學(xué)習(xí)模式下，13例放療全消患者均被準(zhǔn)確預(yù)測(cè)為放療敏感患者，靈敏度100％(13/13)，12例放療未控患者有10被準(zhǔn)確預(yù)測(cè)為放療不敏感患者，特

16、異度83.33％(10/12)，在25例接受放療的喉咽鱗癌患者中有23例被樹狀分析模式正確預(yù)測(cè)，總預(yù)測(cè)符合率為88.00％(23/25)，Kappa值為0.9037。 結(jié)論:喉咽鱗癌和正常對(duì)照相比血清中存在特異性的差異表達(dá)蛋白，m/z為9194.06，11681.15和51370.19的蛋白在喉咽鱗癌患者血清中高表達(dá)，8815.96蛋白在喉咽鱗癌患者血清中低表達(dá)(P≤0.01)。喉咽鱗癌放療敏感組患者血清中m/z為6115.75