Toll樣受體3與HBV感染和HBV宮內(nèi)感染的關(guān)系及其作用機制的研究.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文Toll樣受體3與HBV感染和HBV宮內(nèi)感染的關(guān)系及其作用機制的研究姓名：宋秀霞申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)指導(dǎo)教師：王素萍20080405山兩醫(yī)科大學(xué)博士論文2體外實驗①于2007年4月至2007年10月從山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院婦產(chǎn)科收集正常足月分娩孕產(chǎn)婦26例，收集其肘靜脈及流行病學(xué)資料。分離外周血PBMC，用含10％胎牛血清的1640培養(yǎng)液進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)，設(shè)HBV刺激組和正常對照組，在培養(yǎng)2、

2、4、6天后分別收集PBMC細(xì)胞和培養(yǎng)上清，realtimeRTPCR方法檢測PBMC的TLR3mRNA，F(xiàn)ACs方法檢測PBMC的TLR3蛋白，ELISA方法檢測培養(yǎng)上清液IL2、6、10、12、IFN吖和TNFa的濃度；②用RNAi技術(shù)沉默正常獻(xiàn)血者PBMCTLR3mRNA，用TLR3的配體PolyI：C刺激活化TLR3，并在相應(yīng)處理后與一定量的HBV共孵育6天，在2，4，6天分別收集PBMC細(xì)胞和培養(yǎng)上清，realtimeRTPCR

3、檢測TLR3mRNA，F(xiàn)ACs檢測TLR3蛋白，熒光定量PCR定量檢測培養(yǎng)上清和PBMC中HBVDNA含量。3統(tǒng)計分析資料查實后輸入數(shù)據(jù)庫，采用SPSS130forwindows軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用矛分析，計算各指標(biāo)陽性率、矛值、OR值及其95％可信區(qū)間；計量資料采用t檢驗、配對t檢驗、方差分析及相關(guān)性分析。結(jié)果1HBsAg陽性孕婦PBMCTLR3蛋白和PBMCHBV感染的關(guān)系(L)HBsAg分布在PBMC胞膜和胞漿部位；TL

4、R3分布在胞膜上，TLR3在不同PBMC涂片中表達(dá)強度不同，同一視野下不同的細(xì)胞表達(dá)強度也不同，且在TLR3表達(dá)強的細(xì)胞上HBsAg表達(dá)弱?？?228例HBsAg陽性孕婦有64例(2807％)PBMCHBsAg陽性；161例(7061％)TLR3強表達(dá)；TLR3在PBMCHBV感染組和非感染組的表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(產(chǎn)30944，P104copies／ml組，TLR3mRNA在這三組中差別無統(tǒng)計學(xué)意義(產(chǎn)O468，P005)；且在HBs