高容量血液濾過聯(lián)合內毒素吸附對膿毒癥犬肝細胞線粒體的影響.pdf

1、目的： 采用CLP(盲腸結扎穿孔術)制備犬的膿毒癥模型，對膿毒癥犬進行體外循環(huán)血液凈化治療，觀察高容量血液濾過聯(lián)合內毒素吸附對其血流動力學及肝細胞線粒體的影響。本實驗以觀察膿毒癥時線粒體氧化磷酸化的有關酶活性變化，探討線粒體氧化損傷為切入點，研究血液凈化技術改善膿毒癥肝線粒體能量代謝障礙的可能作用機制。 方法： (1)膿毒癥模型制備：12只健康雜種犬隨機分成2組，分別為模型組、高容量血液濾過聯(lián)合內毒素吸附組(簡稱

2、HVHF組)，每組6只。二組均通過CLP(盲腸結扎穿孔術)制備膿毒素模型。行左股靜脈及左股動脈穿刺術，分別置入5F Swan -Ganz漂浮導管(Arrow，美國)和20G動脈留置針(Ohmeda,美國)，連接Marquette Eagal 4000多功能監(jiān)護儀(美國)行血流動力學監(jiān)測。靜脈注射咪唑安定400ug/kg,維庫溴銨80ug/kg，經口氣管插管，呼吸機控制呼吸，持續(xù)靜脈泵注咪唑安定50ug/kg.h及維庫溴銨40ug/kg.

3、h維持鎮(zhèn)靜、肌松。所有有創(chuàng)操作均在2％利多卡因局部浸潤麻醉下進行。 (2)體外循環(huán)構建：采用右股靜脈留置導管作為CBP治療的血管通路，連接BM25型多功能血液凈化機進行高容量血液濾過聯(lián)合內毒素吸附治療。 (3)觀察指標：二組動物分別在模型制備前基礎值(T0)、造模后1h(T1)、治療1h(T2)、治療2h(T3)、治療3h(T4)、治療4h(T5)時監(jiān)測血流動力學指標及血乳酸(lac)值，實驗結束，處死動物，提取肝臟，測

4、定肝臟線粒體MDA、SOD活性、ROS、ATP酶、P/O比值。 結果： (1)膿毒癥一旦構建成功，具有“高排低阻”的血流動力學特點。兩組血液動力學各指標、肺循環(huán)及及氧合指數(shù)的基礎值(T0)之間差異無統(tǒng)計學意義；兩組均于造模1h(T1)出現(xiàn)HR、PMAP、PVRI明顯增加、MAP和SVRI明顯下降、CI增高及氧合指數(shù)顯著降低。實施HVHF后，HVHF組心率逐漸平穩(wěn)下降，在T2～T5較模型組及治療前(T1)均有顯著性降低。H

5、VHF組MAP、每搏量(SV)明顯上升，顯著高于模型組；HVHF組CI無明顯變化，模型組進行性下降并顯著低于HVHF組；治療結束時HVHF組M PA P、PVRI較模型組顯著降低；治療結束時HVHF組氧合指數(shù)較治療前和模型組顯著升高。血漿乳酸濃度模型組明顯高于HVHF組。 (2)模型組肝線粒體內ATP含量明顯下降，線粒體MDA、ROS含量升高，SOD活性下降，與HVHF組相比有統(tǒng)計學意義。 結論： (1)采用CL

6、P(盲腸結扎穿孔術)的方法可成功地構建犬的膿毒癥模型，且該模型在膿毒癥的誘發(fā)因素、診斷標準、功能變化、病理改變等方面均與臨床相似，從而為進一步研究膿毒癥的形成與發(fā)展，提供了重要的技術平臺。 (2)造模后犬肝線粒體出現(xiàn)能量代謝障礙，肝線粒體ATP含量及能荷水平下降，CBP能改善肝線粒體能量代謝障礙。其機制可能包括：高容量血液濾過聯(lián)合內毒素吸附治療能明顯改善膿毒癥犬的血流動力學，減輕線粒體氧化損傷，能清除心肌抑制物質、致炎介質和毒素