C-EBPα和C-EBPβ基因影響子宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖和侵襲的研究.pdf

1、目的：通過研究C/EBPα和C/EBPβ基因?qū)ψ訉m頸癌HeLa細(xì)胞增殖和侵襲能力的的影響，對深入了解其在子宮頸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用提供新的線索，為子宮頸癌的診斷、治療提供新的靶點(diǎn)和研究方向。
　　方法：1、分別抽提C/EBPα和C/EBPβ質(zhì)粒，然后用脂質(zhì)體法分別轉(zhuǎn)染到子宮頸癌HeLa細(xì)胞。2、應(yīng)用免疫熒光方法評價(jià)C/EBPα和C/EBPβ蛋白質(zhì)表達(dá)水平。3、實(shí)驗(yàn)按干預(yù)因素不同分重組質(zhì)粒組（轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-C/EBPα的

2、HeLa細(xì)胞）、重組質(zhì)粒組（轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-C/EBPβ的HeLa細(xì)胞）、空質(zhì)粒組（轉(zhuǎn)染pcDNA3.1的HeLa細(xì)胞）、對照組（未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞）、用免疫組織化學(xué)的方法檢測各組核蛋白Ki-67觀察細(xì)胞增殖情況、用MTT觀察細(xì)胞增殖情況、基質(zhì)膠侵襲實(shí)驗(yàn)分析細(xì)胞遷移能力、掃描電子顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。
　　結(jié)果：1、免疫熒光結(jié)果顯示：重組質(zhì)粒組熒光蛋白質(zhì)表達(dá)含量明顯高于空質(zhì)粒組和對照組，而空質(zhì)粒組和對照組蛋白表達(dá)無差異

3、。2、免疫組化Ki-67結(jié)果顯示：重組質(zhì)粒組Ki-67蛋白表達(dá)明顯低于空質(zhì)粒組和對照組，而空質(zhì)粒組和對照組Ki-67蛋白表達(dá)無顯著差異。3、MTT結(jié)果顯示：重組質(zhì)粒組增殖率明顯低于空質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞組。轉(zhuǎn)染C/EBPα組的吸光度值為0.21±0.01，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組的吸光度值為0.24±0.01，未轉(zhuǎn)染組的吸光度值為0.24±0.02，轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒組與空質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=17.219，P=0.000），空

4、質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.155)。轉(zhuǎn)染C/EBPβ組的吸光度值為0.38±0.12，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組的吸光度值為0.59±0.17，未轉(zhuǎn)染組的吸光度值為0.68±0.17，轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒組與空質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=9.769，P=0.001)，空質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.230)。4、基質(zhì)膠侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：重組質(zhì)粒組與空質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組相比,細(xì)胞遷移能力減弱。轉(zhuǎn)染C/EBPα組的細(xì)胞穿膜

5、數(shù)為12±2.2，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組的細(xì)胞穿膜數(shù)為39±3.2，未轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞穿膜數(shù)為39.6±2.6，轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒組與空質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=171.00，P=0.000)，空質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.731)。轉(zhuǎn)染C/EBPβ組的細(xì)胞穿膜數(shù)為16±2.3，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組的細(xì)胞穿膜數(shù)為39±3.2，未轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞穿膜數(shù)為39.6±2.6，轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒組與空質(zhì)粒組和未轉(zhuǎn)染組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=121.7