維生素D3及維生素D3聯(lián)合地塞米松對哮喘大鼠治療作用的研究.pdf

1、支氣管哮喘（哮喘）是全球最常見的慢性疾病之一，積極防治哮喘，降低哮喘發(fā)病率和死亡率，是全世界醫(yī)學(xué)界所面臨的共同課題。1,25-二羥維生素D3(1,25-dihydroxyvitaminD3,1,25-(OH)2D3)是體內(nèi)維生素D3最重要的活性代謝產(chǎn)物，主要通過與維生素D受體(vitaminDreceptor,VDR)的結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。隨著對其研究的深入，目前發(fā)現(xiàn)1,25-(OH)2D3除經(jīng)典的調(diào)節(jié)體內(nèi)骨穩(wěn)態(tài)及鈣磷代謝平衡的生理功能

2、外，還具有在哮喘治療中的潛在應(yīng)用前景。本課題旨在加深對1,25-(OH)2D3參與哮喘發(fā)病機(jī)制的理解，為擴(kuò)展其在哮喘治療中的臨床運(yùn)用提供有價值的理論依據(jù)
　　本項研究共分兩大部分
　　第一部分維生素D3對哮喘大鼠治療作用的研究
　　目的：觀察維生素D3對哮喘大鼠血清中IgE，IL-4，IL-5的影響，探討它在哮喘治療中的作用。方法：30只SD大鼠隨機(jī)分為3組，正常對照組（A）、哮喘組(B)、維生素D3組(C)，每組10

3、只。用卵白蛋白（ovalbuminOVA）腹腔注射致敏和霧化吸入激發(fā)建立哮喘大鼠模型，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme-linkedimmunosorbentassayELISA）的方法測定各組大鼠血清中IgE，IL-4，IL-5的含量；結(jié)果：經(jīng)維生素D3干預(yù)后，大鼠血清IgE，IL-4，IL-5的含量均顯著降低，與哮喘組比較差異顯著（P<0.05）。結(jié)論：維生素D3單獨(dú)可有效的降低哮喘大鼠血清IgE，IL-4，IL-5的含量。

4、>　　第二部分維生素D3聯(lián)合地塞米松對哮喘大鼠治療作用的研究
　　本部分共分三個實驗
　　實驗一：對哮喘大鼠支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluidBALF）的細(xì)胞總數(shù)及分類的影響
　　目的：觀察維生素D3聯(lián)合地塞米松對哮喘大鼠BALF中細(xì)胞計數(shù)和分類的影響，從細(xì)胞學(xué)及病理學(xué)方面探討維生素D3聯(lián)合地塞米松在哮喘治療中的可能的作用機(jī)制。方法：40只SD大鼠隨機(jī)分為4組，正常對照組（A）、哮喘

5、組(B)、地塞米松組（C）、維生素D3聯(lián)合地塞米松組(D)，每組10只。用OVA腹腔注射致敏和霧化吸入激發(fā)建立哮喘大鼠模型。收集大鼠BALF并行細(xì)胞計數(shù)及分類，同時取大鼠肺組織行HE染色。結(jié)果：與哮喘組比較，兩治療組大鼠BALF細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞（EosinophilsEOS）均顯著下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與地塞米松組比較，維生素D3聯(lián)合地塞米松組中BALF細(xì)胞總數(shù)和EOS進(jìn)一步降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)

6、。兩治療組支氣管粘膜充血水腫及EOS浸潤等病理變化明顯減輕，肺泡結(jié)構(gòu)存在，組織形態(tài)學(xué)上未見破壞，肺泡壁輕度增厚，肺間隔未見明顯纖維組織增生，肺內(nèi)小血管擴(kuò)張充血，炎癥反應(yīng)輕微。其中聯(lián)合治療組病理變化呈進(jìn)一步減輕。結(jié)論：維生素D3聯(lián)合地塞米松能更有效地能降低哮喘大鼠BALF中細(xì)胞總數(shù)和EOS水平，抑制哮喘大鼠支氣管粘膜充血水腫等炎性反應(yīng)，有效防止氣道上皮的損傷、脫落，這可能與維生素D3對地塞米松抑制哮喘的協(xié)同機(jī)制有關(guān)。
　　實驗二對哮

7、喘大鼠血清IgE的影響
　　目的：觀察維生素D3聯(lián)合地塞米松對哮喘大鼠血清IgE的影響，從血清IgE水平探討維生素D3聯(lián)合地塞米松在哮喘治療中的可能的作用機(jī)制。方法：分組及制模同第二部分，采用ELISA方法測定各組大鼠血清中IgE含量。結(jié)果：兩治療組大鼠血清IgE的含量均顯著降低，與哮喘組比較差異顯著（P<0.05）；其中聯(lián)合治療組血清IgE進(jìn)一步降低，同單用地塞米松組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：維生素D3聯(lián)合地塞

8、米松可有效的降低哮喘大鼠血清中IgE的含量。
　　實驗三對哮喘大鼠血清IL-4，IL-5，IL-15的影響。
　　目的：觀察維生素D3聯(lián)合地塞米松對哮喘大鼠血清IL-4，IL-5，IL-15的影響，從細(xì)胞因子水平探討維生素D3聯(lián)合地塞米松在哮喘治療中的可能的作用機(jī)制。方法：分組及制模同第二部分，采用ELISA方法測定各組大鼠血清中IL-4，IL-5，IL-15含量。結(jié)果：兩治療組大鼠血清IL-4，IL-5，IL-15的含量均