肺臟基質(zhì)細(xì)胞對樹突狀細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf

1、樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DC），是體內(nèi)已知功能最強(qiáng)的專職抗原遞呈細(xì)胞（antigen presenting cells，APC），是免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)，不僅能活化初始T細(xì)胞啟動(dòng)免疫應(yīng)答，還能誘導(dǎo)免疫耐受負(fù)向調(diào)節(jié)免疫，有雙重調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)維持免疫平衡的作用。DC的最終免疫效應(yīng)取決于其發(fā)育階段及所處的免疫微環(huán)境。免疫微環(huán)境不僅為免疫應(yīng)答提供反應(yīng)場所，還通過調(diào)控免疫細(xì)胞的分化發(fā)育和功能來調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。肺臟通過氣道與外界相通，

2、每天都要接觸大量外界抗原卻能維持免疫平衡，可見肺臟有精確的免疫調(diào)控機(jī)制，我們通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)了肺臟基質(zhì)細(xì)胞微環(huán)境對免疫細(xì)胞DC的分化發(fā)育及功能有調(diào)節(jié)作用，這與維持免疫平衡有密切關(guān)系。
　　 目的
　　 觀察小鼠肺臟基質(zhì)細(xì)胞微環(huán)境對骨髓來源成熟樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育及功能的影響，并探討其影響機(jī)制。
　　 方法：
　　 通過小鼠肺臟組織原代培養(yǎng)建立一株成纖維樣基質(zhì)細(xì)胞系，并從細(xì)胞形態(tài)及波形蛋白表達(dá)上給予鑒定，認(rèn)為原代

3、培養(yǎng)的肺臟基質(zhì)細(xì)胞具備成纖維樣細(xì)胞的特點(diǎn)。通過RT-PCR方法檢測肺臟基質(zhì)細(xì)胞高分泌兩種抑制性細(xì)胞因子：TGF-β、VEGF。此基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)上清與完全培養(yǎng)基以1:1的比例混合后用于培養(yǎng)成熟樹突狀細(xì)胞，一周后成熟樹突狀細(xì)胞被誘導(dǎo)成具有獨(dú)特生物學(xué)特性的調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞（DCreg）。HE染色后觀察細(xì)胞形態(tài)特征，特異性夾心酶聯(lián)免疫法檢測培養(yǎng)上清細(xì)胞因子（IL-10和IL-12p70）的含量，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表型表達(dá)水平及吞噬能力，MTT法檢

4、測DCreg誘導(dǎo)同種異體T增殖能力。將上述檢測結(jié)果與成熟樹突狀細(xì)胞進(jìn)行比較，觀察誘導(dǎo)前后樹突狀細(xì)胞的區(qū)別。
　　 結(jié)果：
　　 調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞（DCreg）分泌的細(xì)胞因子IL-10高于成熟樹突狀細(xì)胞組（P<0.01），而IL-12p70的分泌水平低于此組（P<0.01）；細(xì)胞表型與成熟樹突狀細(xì)胞比較，CD11b上調(diào)（P<0.01），CD11c、Ia、CD86下調(diào)（P<0.01）；Dcreg的吞噬能力較未成熟DC低（P<