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1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文聚乙二醇化內(nèi)皮抑素抑制小鼠視網(wǎng)膜新生血管的實驗研究姓名:李志偉申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):眼科學(xué)指導(dǎo)教師:牟國營20060305山東大學(xué)碩士學(xué)位論文聚乙二醇化內(nèi)皮抑素抑制小鼠視網(wǎng)膜新生血管的實驗研究研究生:李志偉導(dǎo)師:牟國營中文摘要目的內(nèi)皮抑素是近幾年發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性血管內(nèi)皮細胞增殖的強效抑制劑。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮抑素能特異性抑制處于增殖狀態(tài)的新生血管內(nèi)皮細胞、并伴有誘導(dǎo)凋亡的作用。然而最近的I期臨床試驗研究結(jié)果表明,內(nèi)皮抑素
2、體內(nèi)半衰期短,生物利用度低。如果能夠通過一定的手段提高其生物利用度、延長其體內(nèi)半衰期以減少給藥劑量或延長給藥周期,將會大大提高內(nèi)皮抑素的治療效果,促進其在臨床上的應(yīng)用。本課題旨在觀察聚乙二醇(PEG)修飾后的內(nèi)皮抑素抑制高氧誘導(dǎo)的大鼠視網(wǎng)膜新生血管的效果,探討其作用機制。材料與方法1PECrES的制備采用氧化法制備聚7醇二酸,然后用聚乙二醇二酸單端封閉分子量為10ku的活化PEG,使用單端封閉的活化聚乙二醇(MWlOku)修飾內(nèi)皮抑素,
3、并采用Gillis等報道的CTLL2細胞短期培養(yǎng)、結(jié)合3H2TdR滲入法進行修飾產(chǎn)物的分離、提純及生物活性測定。2動物實驗采用高氧誘導(dǎo)法建立小鼠RNV模型,將PEGES注入小鼠的玻璃體腔,處死后做組織切片,觀察視網(wǎng)膜新生血管內(nèi)皮細胞數(shù)量及VEGF、PEDF的表達情況。3結(jié)果成功的應(yīng)用聚乙二醇單端修飾了內(nèi)皮抑素,并檢測了其生物活性。C組(PEG內(nèi)皮抑素組)和B組(單純內(nèi)皮抑素組)RNV的長度、面積、微血管數(shù)量均明顯少于對照組(pO05);
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