龍膽苦苷對(duì)膿毒癥急性肺損傷小鼠的保護(hù)作用.pdf

1、目的:觀察龍膽苦苷對(duì)膿毒癥所致的小鼠急性肺損傷的保護(hù)作用，并初步探索其作用機(jī)制。
　　方法:采用盲腸結(jié)扎穿孔(cecal ligation and puncture，CLP)的方法建立小鼠膿毒癥(sepsis)急性肺損傷(acute lung injury，ALI)模型。18～22g雄性昆明小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、龍膽苦苷低劑量組(25mg/kg)、龍膽苦苷高劑量組(50mg/kg)。給藥物組于術(shù)前半小時(shí)尾靜脈注射龍膽苦苷溶

2、液，假手術(shù)及模型組注射等體積的生理鹽水。術(shù)后12h收集肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BLAF)，檢測(cè)其中炎癥因子(TNF-α、IL-6)及總蛋白含量;測(cè)定肺組織中丙二醛(MDA)、髓過(guò)氧化物酶(MPO)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)含量;肺組織HE染色，光鏡下觀察病理改變情況;western blot檢測(cè)肺組織TLR4以及NF-κB的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:模型組術(shù)后12

3、h肺組織中MDA、MPO、iNOS、NO水平較假手術(shù)組明顯升高，肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6含量及總蛋白含量也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于假手術(shù)組;肺組織病理切片HE染色后光鏡下觀察，假手術(shù)組肺泡結(jié)構(gòu)清晰，無(wú)明顯病理變化;模型組肺泡壁明顯水腫、增厚、炎性細(xì)胞和紅細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡結(jié)構(gòu)遭到破壞;術(shù)后12h，龍膽苦苷低、高劑量組肺組織中MDA、MPO、iNOS、NO水平與模型組相比有明顯的降低(P＜0.05或0.01)，肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6含量及總

4、蛋白含量均顯著低于模型組(P＜0.05或0.01)，肺組織病理?yè)p傷明顯減輕但仍有一定程度的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)以及充血水腫，以高劑量組改善最顯著。western blot檢測(cè)的結(jié)果顯示，假手術(shù)組肺組織中TLR4受體及NF-κB蛋白表達(dá)都十分微弱，而模型組TLR4與NF-κB蛋白均呈強(qiáng)表達(dá)，龍膽苦苷兩給藥組TLR4及NF-κ B蛋白表達(dá)水平均明顯低于模型組，且高劑量組下調(diào)的程度較低劑量組更明顯。此外，與模型組相比，給藥組中NF-κB表達(dá)下調(diào)的幅度