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文檔簡介
1、研究和開發(fā)基于復(fù)制缺陷型腺病毒的重組狂犬病毒疫苗將有望有效預(yù)防,控制甚至根除中國狂犬病的發(fā)生.在進(jìn)行體內(nèi)免疫實驗之前,作者對所得到的六株重組病毒的特性進(jìn)行了較為全面的研究.a;透射電鏡觀察到所得的重組腺病毒直徑約為70nm,具有較為典型的腺病毒形態(tài);b:酶切圖譜和PCR鑒定表明在連續(xù)傳代培養(yǎng)過程中,重組腺病毒基因組穩(wěn)定;c:將重組腺病毒DNA轉(zhuǎn)染293細(xì)胞后得到的重組病毒在293細(xì)胞中傳代5次后,病毒滴度可達(dá)約10<'7>-10<'9>
2、pfu/ml.用激光共聚焦顯微鏡測定重組病毒rAdNPaG'感染293細(xì)胞后,EGFP報告基因的表達(dá)時相表明;外源報告基因EGFP的表達(dá)/累積隨著細(xì)胞病變程度的提高而增加.用RT-PCR和Northernblot方法分別檢測了rAdGPaG/rAdGPaG'T rAdGPcvs/rAdGPcvs'感染細(xì)胞中的GP特異性mRNA,結(jié)果表明GP基因可被有效地轉(zhuǎn)錄;在隨后的斑點免疫印跡和Westernblot實驗中,重組病毒rAdGPcvs/
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