金針菇多糖的免疫調(diào)節(jié)作用、抗腫瘤作用及其機(jī)制研究.pdf

1、大量研究表明金針菇具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒、抗炎、抗疲勞、耐缺氧等功能。金針菇中含有多種有效成分，其中金針菇多糖受到廣泛關(guān)注，其主要作用表現(xiàn)為免疫調(diào)節(jié)與抗腫瘤。免疫調(diào)節(jié)方面的研究證明金針菇多糖（FVP）能促進(jìn)正常和荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化，增強(qiáng)NK細(xì)胞活性和增加IL-2的生成，增強(qiáng)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力，增加正常小鼠的血清溶血素含量?？鼓[瘤方面的研究證明金針菇多糖（FVP）對小鼠S180肉瘤、小鼠腹水型肝細(xì)胞癌H22有抑制作用

2、，對治療卵巢癌、乳腺癌都有較好療效。但在細(xì)胞因子水平上金針菇多糖如何發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用和抗腫瘤作用尚不完全清楚，有待深入研究。 目的： 1.研究金針菇多糖（FVP）對正常小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、干擾素-γ（INF-γ）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）的影響，及對脾細(xì)胞代謝MTT活力的影響。 2.研究金針菇多糖（FVP）對正常小鼠腹腔滲出細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的影響，及對腹腔滲出細(xì)胞

3、代謝MTT活力的影響。 3.研究金針菇多糖（FVP）對荷S180實(shí)體瘤小鼠血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、干擾素-γ（INF-γ）含量的影響及抑瘤作用。 4.研究金針菇多糖（FVP）免疫調(diào)節(jié)作用和抗腫瘤作用的作用機(jī)制。 方法： 1.取正常小鼠脾細(xì)胞，加入金針菇多糖（FVP），在37℃下培養(yǎng)48h，收集培養(yǎng)上清，用ELISA方法檢測其中TNF-α、IFN-γ、IL-2的含量，或者用MTT比色法檢測細(xì)胞代

4、謝MTT活力。 2.取正常小鼠腹腔滲出細(xì)胞，加入金針菇多糖（FVP），在37℃下培養(yǎng)10h，收集培養(yǎng)上清，用ELISA方法檢測其中TNF-α的含量，或者用MTT比色法檢測細(xì)胞代謝MTT活力。 3.建立荷S180實(shí)體瘤小鼠動物模型，空白對照組：每天腹腔注射（ip）無菌生理鹽水0.1ml/10g體重，其他組給藥體積與此相同；陽性對照組：每天ip靈芝多糖100 mg/kg；FVP低、中、高劑量組：每天分別ip FVP25、50

5、、100mg/kg；連續(xù)給藥7d后次日上午，分離血清用于TNF-α和IFN-γ的含量測定。取血后，分離瘤體，稱重，并計(jì)算抑瘤率和脾臟指數(shù)。 結(jié)果： 1. FVP（50，100，200μg/ml）可以增強(qiáng)正常小鼠脾細(xì)胞代謝MTT活力，促進(jìn)脾細(xì)胞分泌TNF-α、INF-γ、IL-2，且增強(qiáng)作用隨多糖濃度的增加而增強(qiáng)，在一定濃度范圍內(nèi)具有劑量依賴關(guān)系。與對照組相比，F(xiàn)VP促進(jìn)脾細(xì)胞分泌TNF-α的作用最為明顯。 2.F

6、VP（50，100，200μg/ml）對正常小鼠腹腔滲出細(xì)胞代謝MTT活力有增強(qiáng)作用，可以顯著促進(jìn)腹腔滲出細(xì)胞分泌TNF-α（P=0.000，0.000，0.000），且有一定的濃度依賴關(guān)系。 3. FVP（25，50，100mg/kg）三個劑量組對小鼠S180實(shí)體瘤生長均有抑制作用（P=0.000，0.000，0.000），且可以增加S180實(shí)體瘤小鼠的脾臟指數(shù)（P=0.000，0.000，0.000）。其中，中、高劑量組可提

7、高荷S180實(shí)體瘤小鼠血清中TNF-α的水平（P=0.005，0.000）和INF-γ的水平（P=0.047，0.009），具有一定的劑量依賴關(guān)系。 4.FVP（200μg/ml）能促進(jìn)正常小鼠腹腔滲出細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α，抗TLR4抗體（1和2μg/ml）對這一促進(jìn)作用有顯著的對抗作用（P=0.034，0.010），但不能完全阻斷；然而，p38 MAPK特異性阻斷劑SB203580（20μM）和NF-κB特異性阻斷劑helena

8、lin（10μM），可以完全取消FVP促進(jìn)荷瘤小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分泌TNF-α的作用（P=0.006，0.003）。 結(jié)論： 1.金針菇多糖促進(jìn)正常小鼠脾細(xì)胞代謝MTT活力和分泌細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2。 2.金針菇多糖促進(jìn)正常小鼠腹腔滲出細(xì)胞代謝MTT活力和分泌細(xì)胞因子TNF-α。 3.金針菇多糖抑制小鼠荷S180實(shí)體瘤的生長，并且提高荷S180實(shí)體瘤小鼠血清中TNF-α和IFN-γ的水平