丙戊酸鈉對(duì)體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞增生的抑制作用.pdf

1、目的：探討丙戊酸鈉(sodium valproate，VPA)對(duì)體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細(xì)胞(human lens epithelial cells,HLECs)增生和細(xì)胞周期的影響。
　　 方法：采用不同濃度的VPA(0.5mmol·L-1、1 mmol·L-1、2 mmol·L-1、4mmol·L-1)作用于人晶狀體上皮細(xì)胞,四甲基偶氮唑藍(lán)法(MTT)檢測(cè)在不同時(shí)間點(diǎn)(24h、48h、72h)VPA對(duì)細(xì)胞增生的抑制作用；流式細(xì)

2、胞儀測(cè)定VPA(1 mmol·L-1、2 mmol·L-1)作用于HLECs 48h后細(xì)胞周期分布情況；Western-blot測(cè)定在VPA(1 mmol·L-1、2 mmol·L-1)作用于HLECs 48h后，P21(細(xì)胞周期依賴性激酶抑制因子)在蛋白質(zhì)水平表達(dá)量的改變。
　　 結(jié)果：MTT檢測(cè)顯示VPA對(duì)體外人晶狀體上皮細(xì)胞的增生的抑制作用呈時(shí)間和劑量依賴性。VPA作用48h后，各藥物濃度組(0.5mmol·L-1、1 m

3、mol·L-1、2 mmol·L-1、4mmol·L-1)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率分別為11.05[％]，21.58[％]，26.67％和 38.25[％]，流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示VPA可阻滯HLECs由G0/G1期向S期轉(zhuǎn)換，使G0/G1期細(xì)胞增多，S期細(xì)胞減少。經(jīng)2 mmol·L-1VPA作用48h，G0/G1期及S期細(xì)胞比例分別為85.40±3.90％和 7.35.±1.47[％]，較陰性對(duì)照組(53.14±1.71％和 35.31±1.14[

4、％])差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)VPA可促進(jìn)P21蛋白質(zhì)水平的表達(dá)。VPA處理48h后，各組平均灰度比值分別為0.582±0.082(1 mmol·L-1)和0.914±0.113(2 mmol·L-1)，與陰性對(duì)照組(0.303±0.029)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).
　　 結(jié)論：VPA可以通過促進(jìn)P21表達(dá)，使人晶狀體上皮細(xì)胞阻滯于G0/G1期，最終抑制人晶狀體上皮細(xì)胞