丁香酚處理對采后青茄冷害及其冷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子CBF表達的影響.pdf

1、低溫貯藏是采后果蔬保鮮最通用的方法。茄子（Solanummelongena L.）屬冷敏型果蔬，對低溫十分敏感，果實低溫貯藏易發(fā)生冷害，嚴重制約其低溫貯藏的效果和貯藏時間。冷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子CBF在調(diào)節(jié)植物抗冷方面起關(guān)鍵作用。本試驗以崇明青茄為試材，研究不同濃度丁香酚（5、25和50μL·L-1）熏蒸處理對4℃貯藏下青茄果實品質(zhì)、脯氨酸代謝以及轉(zhuǎn)錄因子SmCBF表達的影響。主要結(jié)果如下:
　　1.丁香酚處理抑制了果實的多酚氧化酶(PP

2、O)活性，降低了冷害指數(shù)(CI)和失重率，維持了較高的總酚和可溶性固形物(TSS)含量，有效延緩了青茄果實冷害的發(fā)生，保持了果實較好的品質(zhì)。
　　2.丁香酚處理提高了脯氨酸合成關(guān)鍵酶Δ1-吡咯琳-5-羧酸合成酶(P5CS)和鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶(OAT)活性，降低了脯氨酸降解關(guān)鍵酶脯氨酸脫氫酶(PDH)活性，從而維持了較高的脯氨酸含量。同時，維持了較高的可溶性糖和可溶性蛋白含量，提高了青茄果實的低溫耐受性。丁香酚處理減輕青茄果實冷害可能與

3、果實脯氨酸和其他滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的提高有關(guān)。
　　3.采用同源克隆結(jié)合RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技術(shù)，從青茄中分離克隆得到CBF基因cDNA全長序列，命名為SmCBF，GenBank登錄號為MG432696。生物信息學(xué)分析結(jié)果表明，SmCBF基因的cDNA全長1151 bp，開放閱讀框(ORF)從106 bp-738bp共633個核苷酸，編碼210個氨基酸，預(yù)測蛋白分子量為23.6

4、kDa，等電點為5.15。氨基酸序列比對結(jié)果表明，SmCBF與馬鈴薯的CBF具有74％的相似度。SmCBF含有一個高度保守的AP2結(jié)合域，在該AP2結(jié)合域的上游和下游分別有兩段保守序列PKK/RPAGRxKFxETRHP和DSAWR。
　　4.實時熒光定量PCR分析結(jié)果表明，4℃貯藏期間，對照組SmCBF的表達水平變化不大，而丁香酚熏蒸處理顯著提高了貯藏期間青茄果實SmCBF的表達。丁香酚處理減輕青茄果實冷害可能與果實SmCBF表