腦紅蛋白通過激活蛋白激酶B信號(hào)途徑減輕阿爾茨海默病樣Tau蛋白過度磷酸化.pdf

1、背景：腦紅蛋白（Neuroglobin，Ngb）是2000年由德國(guó)學(xué)者T．Burmester等發(fā)現(xiàn)的血紅素?cái)y氧呼吸蛋白家族新成員，該發(fā)現(xiàn)打破了攜氧蛋白只存在于血液和肌肉中的傳統(tǒng)概念。由于Ngb主要分布在中樞（包括皮質(zhì)，海馬，丘腦，下丘腦等）和外周神經(jīng)系統(tǒng)（脊髓，視網(wǎng)膜），故命名為腦紅蛋白。阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease，AD）是一種與年齡相關(guān)進(jìn)行性神經(jīng)元大量“丟失”的退行性疾病，在老齡化社會(huì)中AD帶來嚴(yán)重的社會(huì)和家庭負(fù)

2、擔(dān)。AD的特征性腦病變分別是以β-淀粉肽（β-amyloid，Aβ）沉積形成的老年斑和以過度磷酸化的Tau蛋白堆積形成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)（Neurofibrillary tangle，NFT）。最近國(guó)外的研究報(bào)道，Ngb可保護(hù)神經(jīng)元免于Aβ的損傷作用。然而，Ngb是否影響Tau蛋白磷酸化尚未見報(bào)道。
　　 目的：探討Ngb是否與Tau蛋白磷酸化水平相關(guān)，過表達(dá)Ngb是否能夠減輕Tau蛋白磷酸化并闡述其機(jī)制。
　　 方法：本

3、實(shí)驗(yàn)采用免疫印跡（Western blotting）技術(shù)和免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)檢測(cè)AD樣轉(zhuǎn)基因鼠腦中Ngb表達(dá)水平和Tau蛋白磷酸化水平以及它們的共定位。在細(xì)胞水平利用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染技術(shù)在HEK293/Tau細(xì)胞中過表達(dá)Ngb，然后免疫印跡和免疫熒光雙標(biāo)檢測(cè)Tau蛋白磷酸化水平以及與Tau蛋白磷酸化水平的相關(guān)磷酸激酶活性。
　　 結(jié)果：在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)Ngb表達(dá)水平在Tg2576（一種國(guó)際公認(rèn)的過表達(dá)突變淀粉樣蛋白前體的AD模型小鼠）

4、和TgMAPt小鼠（一種表達(dá)人源性Tau蛋白模型小鼠）中顯著下降，且Ngb的表達(dá)水平與Tau蛋白磷酸化程度呈負(fù)相關(guān)。在藥物激活和質(zhì)粒轉(zhuǎn)染過表達(dá)糖原合酶激酶3β（GSK-3β），一種重要的Tau蛋白激酶，誘導(dǎo)Tau蛋白過度磷酸化的細(xì)胞模型中，過表達(dá)Ngb在多個(gè)AD相關(guān)磷酸化位點(diǎn)減輕了Tau蛋白過度磷酸化。Ngb通過激活蛋白激酶B（protein kinase B，or Akt）而達(dá)到對(duì)GSK-3β的抑制，從而減輕Tau蛋白磷酸化。同時(shí)，抑