二甲雙胍預(yù)防2型糖尿病大鼠腎癌作用的研究.pdf

1、目的:隨著糖尿病發(fā)病率逐年增高及發(fā)病人群的低齡化，糖尿病并發(fā)腫瘤的發(fā)病人數(shù)也逐年上升。本研究過喂養(yǎng)高熱量飲食后再通過腹腔注射小劑量的鏈脲佐菌素（STZ），建立具有胰島素抵抗（IR）的2型糖尿病大鼠模型，給予二甲雙胍治療，在此基礎(chǔ)上觀察轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1) 、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達(dá)水平，并探討DM繼發(fā)腎癌的發(fā)病機(jī)制，闡明二甲雙胍阻止或延緩DM對(duì)腎臟損害發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制，并具有預(yù)防

2、腎癌發(fā)生的積極意義。
　　 方法:將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC組)和糖尿病組（DM組），正常對(duì)照組喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料，糖尿病組飼以高糖高脂飼料（其中含蔗糖10％，熟豬油15％，膽固醇2％，膽酸0.25％）4周，誘發(fā)胰島素抵抗，繼以腹腔注射小劑量的鏈脲佐菌素（STZ，30mg/kg）,損傷部分胰腺，使之出現(xiàn)高血糖。8 周末把糖尿病大鼠隨機(jī)分為糖尿病對(duì)照組（DM-C組）、糖尿病二甲雙胍治療組（DM-M組）。DM-M 組以二甲雙胍

3、625mg/kg.d 溶于蒸餾水，分兩次灌胃，NC組和DM-C組給予等量蒸餾水。實(shí)驗(yàn)全程共持續(xù)18 周，于實(shí)驗(yàn)的4 周、8 周、18 周末分別測(cè)量體重，采血測(cè)定空腹血糖（FBG）、空腹胰島素(FINs)、甘油三酯(TG) 、總膽固醇(TC)。18周末取腎臟進(jìn)行HE、免疫組化染色、光鏡電鏡觀察腎臟形態(tài)及病理變化，用免疫組化的方法檢測(cè)腎臟TGF-β1、VEGF和MMP-2 的表達(dá)水平，分析各組中TGF-β1、VEGF、MMP-2蛋白的表達(dá)水

4、平。
　　 結(jié)果:
　　 1.糖尿病組大鼠喂養(yǎng)高糖高脂飲食4周后，其體重較正常對(duì)照組增加，差異有顯著性（P<0.05）；血清TC、TG、HOMA-IR 較正常對(duì)照組升高且差異具有顯著性（P<0.05）； FBG 與正常對(duì)照組相比升高但無顯著性差異（P>0.05），HOMA-IR較對(duì)正常對(duì)照組升高且差異具有顯著性（P<0.05），表明大鼠經(jīng)高糖高脂飲食喂養(yǎng)4 周后誘導(dǎo)出胰島素抵抗。
　　 2．糖尿病組大鼠小劑量腹腔

5、注射STZ 4 周后，體重較正常對(duì)照組升高但無顯著性差異（P>0.05）；血清TG、TC 較正常對(duì)照組升高且具有顯著性差異（P<0.05）；FBG較正常對(duì)照組明顯升高（P<0.05）；FINs 較注射STZ 前降低，但與對(duì)照組比較無顯著性差異（P>0.05）； HOMA-IR與正常對(duì)照組相比顯著升高（P<0.05），提示糖尿病對(duì)照組大鼠胰島素抵抗繼續(xù)存在，至此已成功建立具有高血糖、血脂異常、胰島素不低、胰島素抵抗等特點(diǎn)的2 型糖尿病大鼠

6、模型。
　　 3．18 周末實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，二甲雙胍治療組FBG、FINs水平較糖尿病對(duì)照組降低差異具有顯著性（P<0.05）, HOMA-IR , TG 水平下降較糖尿病對(duì)照組降低具有顯著性差異（P<0.05）。
　　 4．糖尿病對(duì)照組TGF-β1,VEGF,MMP-2的蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組明顯升高(P<0.05)。二甲雙胍治療組TGF-β1,VEGF,MMP-2的蛋白表達(dá)較糖尿病對(duì)照組降低差異具有顯著性（P<0.05）。

7、
　　 5．病理學(xué)變化：NC組大鼠腎小管,小管間質(zhì)區(qū)結(jié)構(gòu)清楚,腎小管上皮細(xì)胞呈方形,大小一致,排列整齊;基底膜完整,間質(zhì)中未見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和纖維組織增生。DM-C組腎小管尤其是近曲小管腫脹、變性、空泡形成,腎間質(zhì)可見慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小管基底膜不規(guī)則增厚。DM-M組病變較輕,腎小管間質(zhì)見少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小管輕度萎縮或管腔擴(kuò)張,上皮細(xì)胞水腫,成區(qū)域性分布,胞漿內(nèi)可見小脂肪空泡,多位于基底部。
　　 結(jié)論:
　　

8、 1．SD 大鼠經(jīng)高糖、高脂飲食誘導(dǎo)4 周后出現(xiàn)高胰島素血癥、胰島素敏感性下降。在此基礎(chǔ)上，小劑量腹腔注射鏈脲佐菌素，損傷部分胰島β細(xì)胞，誘發(fā)出胰島素相對(duì)分泌障礙，胰島素抵抗繼續(xù)存在，至此建立了2 型糖尿病大鼠的模型。該模型具有高血糖、血脂異常、胰島素抵抗、典型腎臟病變等特點(diǎn)。與人類2型糖尿病合并糖尿病腎病的臨床特征類似，故此模型可用于2型糖尿病相關(guān)疾病的研究。
　　 2．經(jīng)二甲雙胍治療后，糖尿病大鼠各種代謝紊亂水平明顯減輕，腎