成纖維激活蛋白α(+)胰腺星狀細(xì)胞促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞遷移和侵襲及機(jī)制研究.pdf

1、博士學(xué)位論文學(xué)校代碼： 1 0 0 2 3學(xué) 號：B 2 0 1 0 0 0 1 0 2 2成纖維激活蛋白Q ( + ) 胰腺星狀細(xì)胞促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞遷移和侵襲及機(jī)制研究所 院 ：姓 名 ：指導(dǎo)教師：學(xué)科專業(yè)：導(dǎo)師小組：研究方向：完成日期：北京協(xié)和醫(yī)院文張廖泉教授普通外科學(xué)胡亞副教授吳元德教授胰腺癌腫瘤微環(huán)境及腫瘤免疫2 0 1 3 年4 月中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文中文摘要研究背景胰腺癌是一種進(jìn)展迅速、死亡率高的惡性

2、腫瘤，其顯著的病理學(xué)特點是間質(zhì)成分較多，纖維增生反應(yīng)明顯。越來越多的研究證據(jù)表明，胰腺癌間質(zhì)在胰腺癌的發(fā)生和發(fā)展中扮演了重要的角色。目前胰腺癌綜合治療效果不佳，預(yù)后差，針對胰腺癌間質(zhì)的研究和治療策略，有可能提高胰腺癌的綜合治療效果，改善胰腺癌患者的預(yù)后。成纖維激活蛋白0 【( F A P 0 【) 作為絲氨酸蛋白酶家族的成員，在激活的間質(zhì)中表達(dá)，參與不同的生理和病理生理過程，如胚胎發(fā)育、傷口愈合、慢性炎癥和惡性腫瘤等。腫瘤間質(zhì)中表達(dá)F

3、A P a 的肌成纖維樣細(xì)胞可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和侵襲、影響腫瘤細(xì)胞凋亡、并與惡性腫瘤病人的不良預(yù)后密切相關(guān)。針對腫瘤間質(zhì)F A P a 新的腫瘤診療策略，吸引越來越多的研究者關(guān)注。胰腺癌間質(zhì)中肌成纖維樣細(xì)胞的主要來源為胰腺星狀細(xì)胞，然而針對表達(dá)F A P a 的胰腺星狀細(xì)胞在胰腺癌的進(jìn)展過程中所發(fā)揮作用及其相關(guān)機(jī)制尚無研究報道。本研究探討F A P a ( + ) 胰腺星狀細(xì)胞在胰腺癌的進(jìn)展過程中所扮演的角色以及與胰腺癌細(xì)胞相互作用的機(jī)

4、制。目的( 1 ) 研究胰腺癌間質(zhì)中F A P a 與胰腺癌臨床病理特點和胰腺癌患者的預(yù)后關(guān)系；( 2 ) 研究F A P 0 【( + ) 胰腺星狀細(xì)胞對胰腺癌細(xì)胞惡性表型的影響；( 3 ) 研究F A P a ( + ) 胰腺星狀細(xì)胞影響胰腺癌惡性表型的機(jī)制。方法( 1 ) 應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測胰腺癌組織切片中F A P a 的表達(dá)情況；分析F A P a與胰腺癌臨床病理特點和胰腺癌患者的預(yù)后關(guān)系；( 2 ) O u t - -

5、 g r o w t h 方法分離人原代胰腺星狀細(xì)胞：采用T G F [ 3 1 誘導(dǎo)胰腺星狀細(xì)胞表達(dá)F A P a ，獲得F A P a ( + ) 胰腺星狀細(xì)胞；C C K 8 檢測在體外F A P a ( + ) 和F A P a( 一) 胰腺星狀細(xì)胞對胰腺癌細(xì)胞增殖的影響；T r a n s w e l l 法檢測在體外F A P a ( + )和F A P a ( 一) 胰腺星狀細(xì)胞對胰腺癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響；使用免疫缺陷裸

6、鼠的皮下移植瘤模型，在體內(nèi)檢測F A P a ( + ) 和F A P 0 【( 一) 胰腺星狀細(xì)胞對胰腺癌細(xì)胞增殖的影響；裸鼠脾臟注射的轉(zhuǎn)移瘤模型，在體內(nèi)檢測F A P c z ( + ) 和F A P c x ( 一)胰腺星狀細(xì)胞對胰腺癌細(xì)胞遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移的影響。( 3 ) 細(xì)胞因子芯片檢測F A P a ( + ) 和F A P a ( 一) 胰腺星狀細(xì)胞表達(dá)的差異細(xì)胞因子；酶聯(lián)免疫吸附測定法，驗證F A P a ( + ) 和