野木瓜提取物鎮(zhèn)痛作用研究.pdf

1、野木瓜為木通科(Lardizabalaceae)野木瓜屬植物,拉丁學(xué)名Stauntonia chinensis DC.,是一種有著重要開發(fā)及藥用價(jià)值的植物類藥材。它作為一種常用中藥,有強(qiáng)心利尿、驅(qū)蟲止痛之功效,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其主要的藥理作用是鎮(zhèn)痛抗炎、阻滯神經(jīng)傳導(dǎo)和放射增敏等,故在臨床上廣泛用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病。目前對(duì)其提取物的鎮(zhèn)痛作用及其作用機(jī)制方面的系統(tǒng)研究尚未見報(bào)道,因此本研究在建立多種實(shí)驗(yàn)性疼痛的動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上,研究

2、了野木瓜根莖提取物(YMG)、YMG的水相提取物(YMGW)和醇相提取物(YMGB)及其子餾分(YMGB1、YMGB2、YMGB3、YMGB4、YMGB5、YMGB6和YMGB7)的鎮(zhèn)痛作用,并探討了有效餾分的可能作用機(jī)制,從而為二次開發(fā)野木瓜植物藥和更深入研究提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)?，F(xiàn)對(duì)本實(shí)驗(yàn)的研究方法和結(jié)果簡(jiǎn)述如下:
　　 本研究首先采用三種鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)對(duì)野木瓜系列提取物進(jìn)行了鎮(zhèn)痛活性篩選。小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與空白組相比,給

3、予YMGW、YMGB、YMGB1、YMGB3、YMGB4、YMGB6和YMGB7(500 mg/kg,i.g.)均能夠顯著抑制小鼠扭體次數(shù),具有較好的鎮(zhèn)痛作用；野木瓜水提物YMGW和野木瓜醇提物YMGB和YMGB6在500 mg/kg的劑量下對(duì)小鼠熱板致痛模型均無鎮(zhèn)痛作用；在大鼠福爾馬林炎性痛模型上,YMG、YMGW、YMGB1、YMGB3和YMGB5(400 meCkg,i.g.)具有較好的鎮(zhèn)痛作用,YMGB6和YMGB7具有明顯的抗

4、炎作用。綜合以上結(jié)果可以看出:野木瓜提取餾分(YMG、YMGW、YMGB和YMGB1-7)中,除YMGB2外,其他餾分均具有較好的鎮(zhèn)痛作用。
　　 其次,采用小鼠醋酸扭體模型和大鼠福爾馬林炎性痛模型進(jìn)一步對(duì)在兩種模型上表現(xiàn)較好鎮(zhèn)痛抗炎作用的餾分進(jìn)行量效關(guān)系和時(shí)效關(guān)系的評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示,YMG、YMGB1、YMGB4、YMGB6和YMGB7五種餾分在320-976 mg/kg濃度范圍內(nèi),隨著給藥劑量的增高,其對(duì)醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)

5、的抑制作用逐漸增強(qiáng),鎮(zhèn)痛作用具有一定的劑量依賴性；YMGB5、YMGB6和YMGW在100-800 mg/kg劑量范圍內(nèi),隨著給藥劑量的增高,其對(duì)福爾馬林所致的大鼠縮足反應(yīng)和足趾腫脹程度的抑制作用逐漸增強(qiáng),鎮(zhèn)痛抗炎作用具有一定的劑量依賴性。另外,YMGB6的鎮(zhèn)痛作用在灌胃給藥45 min時(shí)達(dá)峰值,之后逐漸降低,有效鎮(zhèn)痛時(shí)間約為1小時(shí)。
　　 最后,為進(jìn)一步探討其鎮(zhèn)痛作用機(jī)制,本文首先觀察了阿片受體拮抗劑納絡(luò)酮對(duì)有效鎮(zhèn)痛餾分鎮(zhèn)痛作

6、用的影響,以評(píng)價(jià)其鎮(zhèn)痛作用與阿片受體的關(guān)系。結(jié)果顯示,在小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)中納絡(luò)酮可顯著拮抗嗎啡的鎮(zhèn)痛作用,最大鎮(zhèn)痛百分率降低了63.5％；而同等劑量的納絡(luò)酮對(duì)野木瓜水提物YMGW和醇提物YMGB的鎮(zhèn)痛作用無明顯影響。提示野木瓜提取餾分的鎮(zhèn)痛作用不是由阿片受體介導(dǎo)的。其次,以結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞為研究對(duì)象,評(píng)價(jià)有效鎮(zhèn)痛餾分是否抑制與炎癥反應(yīng)相關(guān)的COX-2蛋白酶的表達(dá)和活性及致炎因子PGE2的生成和釋放。結(jié)果表明,野木瓜水提物YMGW和醇

7、提物YMGB5良好的鎮(zhèn)痛作用可能是通過降低COX-2的表達(dá)水平和抑制酶活力來實(shí)現(xiàn)的；而YMGB、YMGB4、YMGB6和YMGB7的鎮(zhèn)痛作用可能是通過抑制COX-2酶活力,從而抑制PGE2的生成和釋放來實(shí)現(xiàn)的。
　　 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,野木瓜提取餾分(YMG、YMGW、YMGB和YMGB1-7)中,除YMGB2外,其他餾分均對(duì)外周化學(xué)性刺激痛有一定的抑制作用,對(duì)中樞性熱刺激鎮(zhèn)痛作用不顯著；其鎮(zhèn)痛抗炎作用具有一定的劑量依賴性,有效