吸煙對哮喘的影響以及SIRT1在淋巴細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用研究.pdf

1、[目的]：
　　研究吸煙對哮喘患者在哮喘控制、氣道炎癥指標(biāo)的影響，SIRT1與吸煙哮喘患者血液學(xué)檢查指標(biāo)、肺功能之間的相關(guān)性。在CSE誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞炎癥模型上研究SIRT1的作用，探討SIRT1是否能成為評(píng)估吸煙哮喘患者病情嚴(yán)重程度指標(biāo)以及未來治療的靶位點(diǎn)。
　　[方法]：
　　一.選取來自廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科門診確診為哮喘的患者共96例，其中非吸煙組56例，吸煙組40例，18例正常對照組。收集研究對象一般資料，

2、對哮喘患者進(jìn)行ACT評(píng)分(Asthma Control Test，ACT)，抽取研究對象外周靜脈血檢測血清總IgE、嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)（eosinophil count)、檢測肺功能，計(jì)算第一秒末用力肺活量(Forced Expiratory Volume in1 second，F(xiàn)EV1)占預(yù)計(jì)值百分比和第一秒用力呼氣容積（Forced Vital Capacity，F(xiàn)VC）占用力肺活量(FEV1)百分比，即FEV1％預(yù)計(jì)值(Pred

3、icted Values of Forced ExpiratoryVolume in1 second, FEV1％Pred)。
　　二.招募24位志愿者，分為正常組（7例）、正常吸煙組（5例）、哮喘組（8例）、吸煙哮喘組（4例），抽取24位志愿者靜脈血并檢測肺功能(FEV1％)。分離外周血淋巴細(xì)胞，實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)檢測各組淋巴細(xì)胞SIRT1的表達(dá)水平。統(tǒng)計(jì)分析各組SIRT1

4、表達(dá)水平與肺功能的相關(guān)性。
　　三.CSE建立吸煙誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞炎癥模型，Q-PCR檢測SIRT1、IL-8因子的mRNA表達(dá)情況。
　　[結(jié)果]：
　　1.哮喘組與對照組的年齡(t=-1.619，P=0.130)、性別(x2=1.202，P=0.216)均無顯著差異(P＞0.05)，哮喘組的FEV1％預(yù)計(jì)值(t=-3.518，P=0.002)、ACT評(píng)分(t=-2.12，P=0.032)、EO＃(z=-3.421，P=

5、0.001)較對照組均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而哮喘組與對照組的血清總IgE濃度水平(z=-1.524，P=0.132)無顯著差異（P＞0.05）。
　　2.吸煙哮喘組、非吸煙哮喘組的FEV1％預(yù)計(jì)值、ACT評(píng)分差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其中FEVI％(69.75±19.56)，較非吸煙哮喘患者(78.01±17.81)低，兩者比較差異具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。1年內(nèi)哮喘急性發(fā)作次數(shù)(2.67±3.

6、48次)較非吸煙哮喘組(1.87±2.95次)多;平均吸入糖皮質(zhì)激素(inhaledcorticosteroid， ICS)的使用量(454.55±103.35) ug/d較非吸煙哮喘組(382.37±152.03) ug/d多(P＜0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而EOS、IgE無差異(P＞0.05)。
　　3.Q-PCR檢測24個(gè)樣本的相關(guān)因子表達(dá)，SIRT1在哮喘組、吸煙哮喘組較正常人組均顯示有不同程度的升高(P＜0.5)，以哮

7、喘組升高最明顯（P＜0.5），吸煙組較正常組SIRT1增加(P＜0.5)。吸煙哮喘組與非吸煙哮喘組比較，SIRT1下降（P＞0.5）和肺功能較降低(P＜0.5)。24位志愿者的SIRT1水平和肺功能中等負(fù)相關(guān)(P＜0.05，r=-0.453)，所有吸煙者（哮喘吸煙組和吸煙組）SIRT1水平和肺功能明顯負(fù)相關(guān)(p＜0.05,r=-0.56)。
　　4.用3％、6％的CSE處理從樣本分離的淋巴細(xì)胞24小時(shí)，Q-PCR檢測炎癥因子IL-

8、8、SIRT1的表達(dá)，結(jié)果顯示，3％CSE刺激下與對照組相比，IL-8的表達(dá)明顯升高約20倍，差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，SIRT1表達(dá)升高，其中3％CSE作用下約升高4倍(P＜0.05)，6％CSE作用下約升高2倍(P＜0.05)。
　　[結(jié)論]：
　　1.哮喘使患者的肺功能下降，而吸煙更加重了哮喘患者的病情，使其氣道反應(yīng)更加難以控制。
　　2.SIRT1在哮喘的氣道炎癥中是一種保護(hù)性因素，吸煙使SIR