腺苷對顱腦創(chuàng)傷后能量代謝影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：腺苷在級聯(lián)反應(yīng)的過程中，對于興奮性毒性反應(yīng)、能量障礙、低灌注、鈣離子聚集、急性炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、凋亡、血管發(fā)生以及癲癇都有潛在的作用。腺苷在各種腦缺血的模型中的作用已經(jīng)被大量報(bào)道。但是它在腦損傷模型中的作用卻少見報(bào)告。許多腦損傷后關(guān)于能量代謝的研究已經(jīng)完成，但是腺苷在這方面的作用卻不是很清楚。本研究使用微透析技術(shù)，通過觀察腦創(chuàng)傷大鼠傷后致傷對側(cè)海馬區(qū)腦組織細(xì)胞外液中葡萄糖(Glu)、乳酸(Lac)、丙酮酸(Pyru)、甘油(Gl

2、y)的變化以及外源性腺苷，2-氯腺苷和腺苷激酶抑制劑(Abt-702)對其的影響，討論腺苷在繼發(fā)性腦損傷中的作用，探討繼發(fā)性腦損傷的機(jī)制，尋找顱腦創(chuàng)傷的新的治療手段。 方法：健康雄性Sprague-Dawley大鼠48只，體重200-240g，隨機(jī)分為正常組(8只)、致傷對照組(10只)、腺苷治療組(10只)、2-氯腺苷治療組(10只)和Abt-702治療組(10只)共5組；大鼠被10％水合氯醛全麻(0.35g/kg腹腔注射)；

3、麻醉后將大鼠固定于動物頭架上。于中線切開頭皮，用牙科鉆在前囟后4.0mm，矢狀縫旁左開3.0mm處去顱骨，骨窗直徑為4.0mm，暴露保留硬腦膜完整。液壓致傷裝置包括一個(gè)60cm樹脂玻璃圓柱體，其中注滿等滲鹽水。金屬擺錘下落撞擊活塞使小容量的鹽水進(jìn)入封閉的顱腔，由此產(chǎn)生短暫的腦組織的變形和移位。沖擊的壓力值由顱外傳感器測得并保存于存貯示波器。制作大鼠為中等程度腦損傷(152.0±20.3kPa)。液壓致傷后，大鼠再次被固定于動物頭架上。在

4、對側(cè)海馬區(qū)鉆一個(gè)3mm骨孔(前囟后5.5mm，矢狀縫旁左開4.5mm)。微透析探針置入，深度4mm。傷后即開始透析，使用人工腦脊液，灌流速度為4μl/min，每30min收集一管。腺苷治療組和2-氯腺苷治療組傷后0.5h穿刺枕大池，微量注射泵以2μl/min的速度持續(xù)注射3h。腺苷治療組注射腺苷(1000μmol/L，)，2-氯腺苷治療組注射2-氯腺苷(500μmol/L)，Abt-702治療組傷后0.5h行腹腔注射(8μmol/kg溶

5、于二甲基亞砜)，采用微透析技術(shù)每30min連續(xù)收集腦損傷后致傷對側(cè)海馬區(qū)細(xì)胞外液，共計(jì)5h。透析液樣品中Glu、Lac、Pyru、Gly的測定由瑞典CMA.Mcrodialysis公司生產(chǎn)的CMA600微透析分析儀完成。所有數(shù)據(jù)均以-x±s表示，組間及各時(shí)相點(diǎn)均數(shù)比較采用方差分析，多組均數(shù)的兩兩比較采用α檢驗(yàn)。 結(jié)果：在正常組，腦細(xì)胞外液中葡萄糖、乳酸、丙酮酸和甘油的含量在透析后2小時(shí)后保持在穩(wěn)定的水平。其平均含量葡萄糖為110

6、0±253μmol/l、乳酸為430±80μmol/l、丙酮酸為35.0±4.2μmol/l、甘油為18.0±2.3μmol/l。乳酸/丙酮酸比值為12.4±0.2。在致傷組，葡萄糖含量明顯下降，傷后2小時(shí)為630±65μmol/l(P<0.05)，傷后4小時(shí)更下降到710±25μmol/l，比同期3個(gè)治療組都低(P<0.05)。腦間質(zhì)液中乳酸在傷后1.5小時(shí)升高到960±68μmol/L，在傷后4小時(shí)為780±38μmol/L，比同期

7、傷前和其余3個(gè)治療組都明顯增高(P<0.05)。腦間質(zhì)液中丙酮酸的含量穩(wěn)定在31.2±5.3μmol/l至33.5±4.3μmol/l(P>0.05)。甘油也保持穩(wěn)定，為41.1±3.5μmol/(P>0.05)。乳酸/丙酮酸的比值增大至25.1±3.5。在腺苷治療組，葡萄糖在傷后2小時(shí)減少至最低為658±43μmol/l，后逐步升高。在二氯腺苷治療組，葡萄糖在傷后2小時(shí)減少到710±58μmol/l(P<0.05)，然后逐步升高，Ab

8、t-702組葡萄糖的變化與二氯腺苷治療組無明顯差異(P>0.05)。在腺苷治療組，乳酸在傷后2.5小時(shí)增加至758±45μmol/L(P<0.05)，而后逐漸降低。在二氯腺苷治療組，乳酸在傷后1.5小時(shí)增加到754±48μmol/L(P<0.05)，然后逐漸減少，Abt-702組，乳酸在傷后1.5小時(shí)增加至763±48μmol/L，而后逐漸降低。腦細(xì)胞外液中乳酸/葡萄糖(L/G)比值，傷后持續(xù)升高。在腺苷治療組，L/G傷后2小時(shí)達(dá)到最高

9、為1.12±0.28而后逐漸減少。在二氯腺苷治療組和Abt-702組，L/G比值變化基本一致(P>0.05)。腦細(xì)胞外液中乳酸/丙酮酸(L/P)比值，傷后L/P比值亦持續(xù)升高，在腺苷治療組，L/P值傷后逐漸升高，傷后1.5小時(shí)達(dá)到最高為23.8±0.13，而后逐漸降低。腺苷治療組、在二氯腺苷治療組和Abt-702組，L/G比值變化基本一致(P>0.05)。 結(jié)論：研究的數(shù)據(jù)顯示在顱腦損傷的早期，在相對正常腦組織發(fā)生了能量代謝的失